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电泳拖尾怎么办？1

lijing320323

2023/03/24

其他色谱仪综合讨论

电泳出现拖尾现象，英文成为smear，就是弥散。其原因，主要从以下两个方面考虑：

1、PCR产物自身原因：

往往由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多，而造成PCR的非特异性产物过多。

对策：

①减少Taq酶的量，或调换另一来源的酶。

②减少dNTP的浓度。

③适当降低Mg2+浓度。

④增加模板量，减少引物的用量，减少循环次数，提高退火温度。

2、电泳体系的问题：

（1）电泳缓冲液TAE或者TBE的污染，建议更换缓冲液。（2）上样时样品漂了，建议增加上样缓冲液的用量，以及小心加样。

（3）电压太高。

（4）适当把你的胶的浓度加大。（根据你的片断大小而定）（5）观察你的marker是否也存在拖尾现象，作为对照

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