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【求助】这种情况是色谱柱不行了么?

其他色谱仪综合讨论

  • 我用的是GPC纯化系统,从去年底开始用,断断续续地开过几次机,所以应该不至于老化到什么程度。
    几天前因为马虎,进了一针高浓度的标(约3、4ug/ml),然后大概过了一两个小时就关机了,这次开机发现即便是走空样,也会出标样的峰,试了多次皆是如此,不论换样品瓶换空白试剂都不起多大作用。
    搞不明白是哪里出问题了,哪位能给我点提示?
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  • huacai

    第1楼2010/07/11

    呵看样子是残留,得老化柱子

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  • peetree

    第2楼2010/07/11

    怎么老化?使用温度一直是40度。难道升温?

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  • peetree

    第3楼2010/07/12

    自己顶吧。生手,问题多多。
    另外还有基线走不平。一开始没注意到这个问题,因为色谱栏默认显示的y轴单位挺大的,最近我试试它的自动检测基线功能,才发现跳得厉害,比50uV的限值大多了,而且还漂,一般都是下漂,上漂也有。

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  • 小不董

    第4楼2010/07/14

    应助达人

    那可能是你进了高浓度的样品,没事,你多冲冲,多进几次空白样品,把样品的残留冲干净就好了。由于你进了特高浓度的样品,所以一下子是不容易冲干净。有峰出来说明色谱柱没有问题, 也可以把柱子拆下来,先冲冲进样口和管路,看是否还有峰。我看很大可能是进样口那里的残留最多。不知道你用的进样系统是手动的还是自动的。手动的多旋转几次,用进样针多用空白溶剂冲洗几次,实在不行就拆下来清洗。

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  • peetree

    第5楼2010/07/15

    用的是自动进样器。我不太明白GPC里的管路设计,就是在软件操作界面上点“洗针”那个图标,以及进样器purge,偶尔把两个泵也purge一回,这样反复弄了好几个小时,耗了不少流动相,但是打开气质,GPC进空白溶剂,发现气质那边还是有很多峰,虽然强度不高,也跟标品峰都对不上,但是绝对不是空白应该有的结果,气质那边单走空白的话,给出的是很平的基线,证明GPC这边的污染还是没消除。还有,耗了几个小时之后的空白响应,和上一天做的空白响应,两个强的尖峰高度减小1/4左右吧,矮峰差别不大,就目测的逢高和峰面积来说。
    自己拆卸的话,我怕装上去就不像起初那么密实了。怎么办?

    小不董(doxw0323) 发表:那可能是你进了高浓度的样品,没事,你多冲冲,多进几次空白样品,把样品的残留冲干净就好了。由于你进了特高浓度的样品,所以一下子是不容易冲干净。有峰出来说明色谱柱没有问题, 也可以把柱子拆下来,先冲冲进样口和管路,看是否还有峰。我看很大可能是进样口那里的残留最多。不知道你用的进样系统是手动的还是自动的。手动的多旋转几次,用进样针多用空白溶剂冲洗几次,实在不行就拆下来清洗。

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  • 小不董

    第6楼2010/07/15

    应助达人

    你是用GPC来纯化,然后进GC-MS?
    自动进样器就比较麻烦,每家公司的设计都不一样,如果你这GPC是做纯化的,那进样量应该不小。清洗是就更不容易,那多进几次溶剂或流动相吧。
    从你实验结果来看,洗了几个小时,有一定的效果,是否可以修改方法, 减小运行时间,多进几次空白样品,这样来清洗。不拆柱子,不知道对你柱子影响有多大。
    拆卸柱子不困难,做了一次,下次就有谱了,不然你永远都胆怯。

    peetree(peetree) 发表:用的是自动进样器。我不太明白GPC里的管路设计,就是在软件操作界面上点“洗针”那个图标,以及进样器purge,偶尔把两个泵也purge一回,这样反复弄了好几个小时,耗了不少流动相,但是打开气质,GPC进空白溶剂,发现气质那边还是有很多峰,虽然强度不高,也跟标品峰都对不上,但是绝对不是空白应该有的结果,气质那边单走空白的话,给出的是很平的基线,证明GPC这边的污染还是没消除。还有,耗了几个小时之后的空白响应,和上一天做的空白响应,两个强的尖峰高度减小1/4左右吧,矮峰差别不大,就目测的逢高和峰面积来说。
    自己拆卸的话,我怕装上去就不像起初那么密实了。怎么办?

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  • crystal_cc_ice

    第7楼2010/08/06

    GPC的柱子是有一定承载能力的,如果浓度过高,肯定超出了范围,有很多残留在柱子里面,所以可以冲柱子,多冲,直到没有标样峰为止,这个时候,不能舍不得流动相了哦

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  • goosecat

    第8楼2012/06/28

    同意楼上的,走基线,多走一段时间,

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  • 漂白后的三文鱼

    第9楼2014/10/10

    恩 同意楼上上,多跑跑基线吧

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  • wfuse001

    第10楼2014/11/24

    应助达人

    你进了特高浓度的样品了。没法的,只能编N多个洗针程序,多走走,估计走个十来个小时能洗干净。

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