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使用水或流动相作替代基质时回收率的问题

  • Ins_10b0ecfd
    2023/05/24
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 使用水或流动相作为替代基质的时候,后续加入提取试剂,不是相当于又稀释了一些倍数吗,这样回收率岂不是很低?
    比如
    A纯溶液:10μl质控样品+190μl水+内标
    B先前处理:100μl水+200μl甲醇混匀,取190μl+10μl质控样品+内标
    C正常:10μl质控样品+190μl水+内标+200μl甲醇

    这样起码C溶液中目标化合物相比B溶液中目标化合物的浓度又稀释了2倍,这样回收率会偏低吧?
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  • 通标小菜鸟

    第1楼2023/05/24

    应助达人

    如果单从质控样品和溶液体积来说,确实C溶液的体积是B溶液的两倍,而加入的质控量是一样的,浓度为B的1/2,如果是用外标法定量的话。但楼主使用的是内标法定量,C中的内标浓度为B中内标浓度的一半,通过内标的折算,C中浓度不会减小。不过算浓度有点复杂,计算回收率最好不要带体积,用绝对量计算会好一点

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  • 歌名

    第2楼2023/05/25

    应助达人

    1.回收率偏低不偏低还要看你的内标是怎么添加的,还有后续处理怎么样。
    2.单从体积看的话AB的体积是低于C的体积的(少一半)。

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  • hujiangtao

    第3楼2023/05/25

    应助达人

    回收率是看你质控检测值和加入绝对量的比值,和体积关系不大,C理论上机浓度是A、B的一半,而且内标法可以同时校正前处理回收率和基质效应,理论上讲差别不大

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  • Leuchi666

    第4楼2023/05/26

    你这个应该是计算(质控/内标)的比值,3个操作的比值是一致的

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  • Ins_10b0ecfd

    第5楼2023/06/01

    请问是
    (C溶液中目标化合物的峰面积/内标峰面积)/(B溶液中目标化合物的峰面积/内标峰面积)*100%
    这样计算吗?

    通标小菜鸟(v3141805) 发表:如果单从质控样品和溶液体积来说,确实C溶液的体积是B溶液的两倍,而加入的质控量是一样的,浓度为B的1/2,如果是用外标法定量的话。但楼主使用的是内标法定量,C中的内标浓度为B中内标浓度的一半,通过内标的折算,C中浓度不会减小。不过算浓度有点复杂,计算回收率最好不要带体积,用绝对量计算会好一点

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  • Ins_10b0ecfd

    第6楼2023/06/01

    好的,谢谢~

    Leuchi666(Ins_0bb5bacc) 发表:你这个应该是计算(质控/内标)的比值,3个操作的比值是一致的

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