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色谱图分不开怎么办?

  • Ins_e020ef66
    2023/07/20
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 提取溶剂:甲醇:乙腈:水=2:2:1,个人认为提取物应该大部分为极性代谢物。
    所用仪器:赛默飞QE
    检测条件和TIC图如下:
    正离子模式负离子模式
    色谱柱:美国Waters公司
    BEH C8柱(1.7μm2.1×100mm
    色谱柱:美国Waters公司
    HSS T3柱(1.8μm2.1×100mm
    柱温:50℃柱温:50℃
    进样体积:5μl进样体积:5μl
    流速:0.35ml/min流速:0.35ml/min
    流动相A相:0.1%甲酸/流动相A相:0.1%甲酸/
    流动相B相:0.1%甲酸/乙腈流动相B相:0.1%甲酸/乙腈
    梯度洗脱程序:
    0-1min5%B);
    1.1-11min5%-100%B);
    11.1-13min100B);
    13.1-15min5%B)。
    梯度洗脱程序:
    0-1min5%B);
    1.1-11min5%-100%B);
    11.1-13min100B);
    13.1-15min5%B)。


    更改流动相梯度如下,其他条件不变

    正离子模式负离子模式
    梯度洗脱程序:
    0-1min5%B
    1-6min5%-20%B
    6-9min20%-50%B
    9-13min50%-95%B
    13-15min,保持95%B
    梯度洗脱程序:
    0-1min5%B
    1-6min5%-20%B
    6-9min20%-50%B
    9-13min50%-95%B
    13-15min,保持95%B

    得到TIC图如下:

    结果感觉没有之前好了,不知道下一步该怎么优化?
    +关注 私聊
  • 歌名

    第1楼2023/07/20

    应助达人

    1.,色谱柱多冲洗下,有时间的话高水相高有机相换着来冲洗过夜
    2. .色谱柱干哈POS和NEG要换柱子呢??没必要,也不好看数据,同个样品都用同个柱子跑就行
    3. 洗脱梯度拉长到35min、
    4. 跑样前更新一下exclusion

0
    +关注 私聊
  • houjjun

    第2楼2023/07/20

    洗脱的太快了,尤其是30%-60%这一段,把总时间控制在30以上分钟,30%-60%控制在15-20分钟

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