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聊一聊实验室菌株的管理
Ins_fc69c721
2023/08/01
私聊
乳制品检测
聊一聊实验室菌株的管理
一
复苏:
1.
冻干粉无需恢复至室温即可操作。
2.用75%酒精棉擦拭冻干管表面进行消毒,将管顶端于酒精灯外焰上均匀加热。
3.立即滴2~3滴无菌水于加热部位,使管壁破裂。
4.用镊子或其它适宜工具敲下破裂处。
5.用无菌吸管吸取0.5mL左右液体培养基于冻干管中将冻干菌粉全部溶解。
6.将溶解后的菌悬液转移至盛有4~5mL液体培养基的试管中混匀,可将残留在吸管中的1-2滴菌悬液转接至固体培养基上。
7.将液体试管和斜面试管于推荐条件下静置培养,以液体培养结果为准。
二
复苏注意事项:
1.打管操作应在生物安全柜中操作。打管时冻干管应远离面部,并适当保护眼睛。
2.打管操作应在烧杯或托盘上方进行,用完的冻干管应高压灭菌处理后丢弃。
3.冻干管打开后需一次用完,不能留存。
4.菌种经过冻干保藏后,处于休眠状态,一代菌种需适当延长培养时间,转接至2-3代恢复活力。一般来说,菌种培养稳定后才能用于后续实验。
三
传代
1. 培养基应新鲜制备,如斜面已无冷凝水,不宜再使用。
2. 冰箱取出的菌种斜面,应在室温放置约30分钟,待温度平衡后再传入阳性接种室。
3. 点燃酒精灯,用左手握住菌种斜面,将管口靠近火焰旁,右手拿接种环后端,将接种环烧红30秒,随后将全部接种环金属部分在火焰上烧灼,往返通过3次。左手将管口在火焰上旋转烧灼,右手用无名指、小拇指及掌部夹住硅胶塞,拨开硅胶塞,将接种环伸入管内,先在近壁的琼脂斜面上靠一下,稍冷却再移至菌苔上,刮去少量菌苔,随即取出接种棒,并将菌种管口移至火焰旁,堵上硅胶塞。
4. 左手将菌种管放下,取营养琼脂斜面一支,照上述操作打开硅胶塞,将接种环伸入管内至琼脂斜面的底部,由底向上,将接种环轻贴斜面的表面曲折移动,使菌种划在斜面表面上。
5. 取出接种棒,在火焰旁将硅胶塞堵上,然后将接种过菌的接种棒在火焰上烧灼灭菌。
6. 培养:将已接种完毕的菌种试管置于培养箱中进行培养。
四
注意事项
1.菌种检定菌管理员双人负责发放,并填写记录。
2.菌种应贴有标签,菌种标签应标明菌种的名称、菌种编号、传代日期、传代人、有效期至、贮藏条件;工作菌液标签应标明菌种名称、菌种编号、制备日期、制备人。
3 .遇其中一名管理员休息等特殊情况需要领用的,高级别人员与另一名管理员按照进行发放。
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