新手“过柱”心得

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2023/08/01
安阳疾控理检队

私聊

分离/萃取

新手“过柱”心得

多功能净化柱是一种常见的化学实验室工具，广泛应用于样品制备和分析，其基本结构为由玻璃或塑料制成的管子，内部填充有各种不同的材料，如硅胶、活性炭、离子交换树脂等，多功能净化柱可以通过选择不同的填料来去除样品中的杂质、浓缩目标组分、调节溶液pH值等，在化学分析中，多功能净化柱是一个必备的工具。

在液质组的工作总是不可避免的有过柱子的步骤，比如前段时间刚完成的禽肉和禽蛋中硝基咪唑类药物残留的测定就需要用到MCX固相萃取小柱净化。首先要用5 mL甲醇、5 mL水、5 mL 2%三氯乙酸溶液依次活化，然后将提取液转移到固相萃取柱上，上样完毕后依次用5 mL水、5 mL甲醇淋洗固相萃取柱，然后用5 mL 5%氨化甲醇洗脱，收集洗脱液，步骤繁琐，耗用时间长（大概需要30 min），需要十分的耐心和专注才能做好。一次只看一个柱子肯定是能看好，但样品量大的情况下为提高效率要一次过6个样品就会状况百出，有的时候不知道进行到哪一步了，有的时候活化完柱子都要干了还没来得及上样，手忙脚乱的就会逐渐失去耐心。

后来过柱子过的多了也总结出来一些经验，首先柱子的流速要尽可能的调成一致，另外可以每完成一步在柱子上画符号简单标记一下，要保证柱子活化完立马上样不能出现“干”的情况，若出现看不住的情况可以暂时关闭阀门，但是阀门关闭次数多了之后，下边的塑料管容易堵塞，还是尽量少关闭阀门。另外在过柱子的过程中发现若是大批样品同时离心，离心完的样品没有马上过柱会出现浑浊的情况，再过柱就会出现堵塞，所以建议样品量大的时候可以分批离心，离心一批过柱一批，不要全部离心完再过柱。

在用高效液相色谱法检测木耳、银耳和粉浆饭中的米酵菌酸中用到了MFC335固相净化柱（如图1），将离心后样品转移到玻璃试管之后，将净化柱旋转向下压，取纯化后的样品过滤膜后上机测定（如图2）。在向下压的时候我本想着用手掌可以更好的使劲却忘了用手掌堵住净化柱之后往下压的过程试管内压力增大，最终导致样品从试管中溢出。

以上是我这个新手在过柱过程中的心得体会，希望以后过柱能越来越顺利！

图 1：MFC335固相净化柱图 2：样品纯化步骤