QuEChERS结合三重四级杆气质测定油桃中19种农药残留

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2023/08/01

私聊

气质联用（GCMS）

^{?摘要：油桃经QuEChERS法提取净化后，根据19种农药特征碎片离子建立气质联用条件检测，MRM模式下定量。结果表明，油桃中19种农药的加标回收率在77.1%～121.4%之间，符合农药残留分析要求。该方法操作简单，溶剂消耗少，适用于油桃中农药残留测定。}

关键词：油桃；农药残留；气质联用法

油桃原产于我国西北黄土高原，我国拥有1000多个品种。油桃作为桃的一个变种，因其果面光滑无毛，很受广大消费者欢迎。甘肃河西的紫桃、新疆的黄肉李光桃是其典型代表。油桃营养丰富，所含成分复杂，如含糖13%、有机酸1.5%、果胶1%、蛋白质1.1%等，这些成分对农残分析造成巨大的干扰。近年来，农药残留检测的提取方法集中在液液萃取、固相萃取、QuEChERS等方法，其中QuEChERS以高效、简便、易操作等优势应用广泛。油桃中农药残留的检测少有报道，本文基于QuEChERS法开发了气质联用检测油桃中多种农药残留的方法^［1^－2^］。

1.1 材料与试剂

油桃：市售；乙酸乙酯、丙酮、乙腈（均为色谱纯）：迪马科技有限公司；无水硫酸镁（分析纯）：天津致远化学试剂有限公司；萃取盐包：北京本立科技股份有限公司；Quick Pro净化柱（QuEChERS-PP、QuEChERS-CP、QuEChERS-HF）：河南华仁健康科技有限公司；陶瓷均质子：安捷伦科技（中国）有限公司；0.22μm微孔滤膜：安捷伦科技（中国）有限公司；敌敌畏、氧乐果、甲拌磷、五氯硝基苯、百菌清、甲基对硫磷、马拉硫磷、毒死蜱、对硫磷、水胺硫磷、甲基异柳磷、腐霉利、丙溴磷、三唑磷、联苯菊酯、氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯标准品（浓度均100ug/mL）：来自天津农业部环境保护科研监测所。

1.2 仪器与设备

安捷伦7890B-7000C气相色谱串联质谱仪：安捷伦科技（中国）有限公司；XH-C型多管漩涡混匀器：山东青云实验耗材有限公司；MH503电子天平：德国赛多利斯SARTORIUS公司；FJ-200均质仪：德国IKA公司。

1.3 方法

1.3.1 标准溶液配制

1.3.2 标准溶液配制及标准曲线绘制

混合标准中间液：分别吸取1.0mL 100μg/mL各农药标准液置于100mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度线，得到浓度为1μg/mL 的混合标准中间溶液，在4℃下避光、密封条件下保存。

基质混合标准使用液：分别移取混合标准溶液40ul、60u、80ul、100ul、120ul，用空白基质提取液定容至1ml，混匀，配制成系列混合标准使用液。

1.3.3 样品前处理

准确称取油桃试样10g（精确到0.01）于50mL离心管中，先加入10 m L乙腈，均质2 min，加入六颗陶瓷均质子，然后加入萃取盐包，涡旋混合1 min，于冰水浴冷却，4000 r/min条件下离心5 min，取1.0mL上清液到套有0.22μm微孔滤膜的QuEChERS-PP净化柱中，用推杆将提取液过滤到样品瓶中，待测定。

1.3.4 分析条件

色谱条件：色谱柱：HP-5MS（30m×250μm×0.25μm）；载气：高纯氦气（He）；进样口温度：250 ℃；柱箱升温程序：初始温度设为60℃，保持1min，以每分钟40℃速率升到120 ℃，以每分钟5℃速率升到310℃，保持3.5min；色谱柱流量：1.2 mL/min；进样量：1.0μL；进样模式：不分流进样^[2]。

1.3.5 质谱条件

电离能量：70 eV；离子化模式：EI+；离子源温度：280 ℃；四级杆1温度：150℃；四级杆2温度：150℃；传输线温度：230℃；涡轮泵转速：100%；延迟时间：3 min；扫描方式：多重反应监测（MRM），19种目标农药在此条件下的保留时间及离子参数见表1。

序号	农药名称	保留时间/min	定量离子/(m/z)	定性离子 1/(m/z）	定性离子 2 /(m/z)	定性离子 3/(m/z)
1	敌敌畏	5.329	187.1	184.9	109	93
2	氧乐果	9.728	155.9	110.1	78.9
3	甲拌磷	13.455	260	230.9	128.9	121
4	五氯硝基苯	14.871	295	236.7	142.9
5	百菌清	15.276	265.7	231	167.8
6	甲基对硫磷	17.628	262.9	232.9	109
7	马拉硫磷	18.768	172.8	126.9	99	55
8	毒死蜱	19.059	313.8	285.9	198.9	171
9	对硫磷	19.095	290.9	138.9	109	91
10	水胺硫磷	19.318	135.9	108	69
11	甲基异柳磷	19.957	241	199	121
12	腐霉利	20.597	284.8	96	67.1	53.1
13	丙溴磷	22.350	338.8	296.8	268.7	207.9
14	三唑磷	24.685	257	161.2	134.2	106.1
15	联苯菊酯	27.383	181.1	166.1	165.1
16	氯氟氰菊酯	28.837	208	197	181	141
17	氰戊菊酯	31.120	181	163	152.1	91
18	氯氰菊酯	31.899	224.9	208.9	141.1
19	溴氰菊酯	34.997	252.9	250.7	171.9	93

表1 19种农药的保留时间及离子参数

1.4 数据处理

采用7890B-7000C自带Mass Hunter化学工作站及 Excel软件进行数据处理。

2 结果与分析

2.1 仪器条件优化

进样口温度从230～280 ℃进行考察，250 ℃时各组分响应较好，所以进样口温度设置为250 ℃。总离子流色谱图结果见图1。结果表明，在本次实验的仪器条件下，各组分能够分离，峰宽窄，无拖尾现象。

图1 19种农药混标的总离子流色谱图

注：峰形上方的编号与表1中各组分编号代表的目标农药相对应

2.2 方法优化

2.2.1 缓冲体系的选择

目前QuEChERS方法常用的缓冲体系有乙酸-乙酸钠、柠檬酸钠-柠檬酸氢二钠体系，即美国农药国际标准分析方法和欧洲法定标准分析方法，本实验选用EN方法萃取盐析包，避免乙酸进入气相系统，延长色谱柱寿命，降低仪器维护成本。

2.2.2 提取溶剂的选择

农药残留检测常用的提取溶剂有丙酮、乙腈、乙酸乙酯。不同提取溶剂的总离子流色谱图见图1。丙酮极性较乙腈弱，能够溶解部分脂溶性和水溶性的色素并且与水很难分离，净化较为困难，回收率不稳定；乙酸乙酯极性较弱，对于较强极性的农药提取不完全，回收率偏低。乙腈对大部分农药有较大的溶解度，且与水易分离，提取效果好，回收率稳定，故本实验选用乙腈作为提取溶剂。当加标量为0.01mg/kg时，分别用乙腈、丙酮、乙酸乙酯作为提取试剂时，目标农药回收率结果如表2所示。结果显示，用乙腈作为提取溶剂时，提取效果最佳，丙酮和乙酸乙酯次之。

表2不同提取溶剂（乙腈、丙酮、乙酸乙酯）的提取效果

2.2.3 方法的回收率及精密度

称取18份空白油桃样品进行3水平加标回收实验，19种目标农药的线性回归方程、相关系数r、检出限、定量限结果见表3，回收率及相对标准偏差（RSD）结果见表4。由表4可知，样品在55 ug/kg、70ug/kg、100ug/kg的添加水平下，回收率在77.1%～121.4%之间，检出限在0.0003～0.3mg/kg之间，定量限在0.01～6mg/kg在之间，回收率实验结果相对标准偏差（RSD）在1.9%～11.5%之间，能够满足分析要求。

序号	化合物名称	线性回归方程		r	检出限（mg/kg）	定量限（mg/kg）
1	敌敌畏	Y=5629806.265137X-122325.88	0.09974		0.004	0.1
2	氧乐果	Y=2859230.769021X-77182.54	0.09943		0.0003	0.02
3	甲拌磷	Y=6980192.423168X-139049.04	0.09915		0.0007	0.01
4	五氯硝基苯	Y=217767.35198X-46938.34	0.09946		0.01	0.02
5	百菌清	Y=2992047.22642X-55191.69	0.0993		0.02	0.2
6	甲基对硫磷	Y=3804708.46600X-179319.92	0.09968		0.003	0.01
7	马拉硫磷	Y=8030446.956520X-179319.92	0.09966		0.3	6
8	毒死蜱	Y=4038063.739886X+9551.85	0.09996		0.01	3
9	对硫磷	Y=2257357.742184X-52778.25	0.09943		0.004	0.01
10	水胺硫磷	Y=7911440.825008X-228284.22	0.09996		0.003	0.05
11	甲基异柳磷	Y=15815639.34407X-307111.25	0.09974		0.003	0.01
12	腐霉利	Y=7770801.681796X-74463.93	0.09962		0.1	5
13	丙溴磷	Y=1798903.393321X-39961.76	0.09966		0.03	0.2
14	三唑磷	Y=3379631.757553X-76728.73	0.09912		0.001	0.2
15	联苯菊酯	Y=27401097.131504X+41751.58	0.09984		0.01	0.05
16	氯氟氰菊酯	Y=5085679.979074X-138931.42	0.09888		0.02	0.5
17	氰戊菊酯	Y=1914223.561484X+9115.28	0.09884		0.02	0.2
18	氯氰菊酯	Y=1953480.197861X+3881.06	0.09968		0.02	1
19	溴氰菊酯	Y=1999775.528524X+846.28	0.09984		0.01	0.05

表3 19种目标农药的线性回归方程、相关系数、检出限和定量限

序号	组分	3个农药加标水平（ug/kg）
		55		70		100
		回收率（%）	RSD (%)	回收率（%）	RSD (%)	回收率（%）	RSD (%)
1	敌敌畏	109	9.46	95.7	6.85	98.8	4.04
2	氧乐果	92.7	8.55	80.2	9.45	76.5	11.41
3	甲拌磷	75.8	6.71	90.0	8.89	89.2	11.01
4	五氯硝基苯	107.3	18.0	102.8	10.27	98.5	15.15
5	百菌清	110.0	4.1	91.4	12.66	106.3	5.0
6	甲基对硫磷	105	5.2	77.1	9.8	95	5.3
7	马拉硫磷	105	13.4	77.1	8.5	103	2.9
8	毒死蜱	114.5	20.6	83.6	18.6	89.0	12.3
9	对硫磷	120.8	21.4	118.6	15.7	119	16.8
10	水胺硫磷	92.9	7.8	78.6	27.3	101.3	2.9
11	甲基异柳磷	110.7	9.8	88.6	12.9	98.3	2.0
12	腐霉利	108.4	6.8	84.3	18.6	90.0	12.2
13	丙溴磷	103.6	7.6	82.9	20.7	101	1.0
14	三唑磷	111.1	9.8	80.0	25	110.0	9.1
15	联苯菊酯	107.2	18.6	104.3	4.1	120.1	16.7
16	氯氟氰菊酯	94.5	5.8	97.1	2.9	105.2	4.8
17	氯氰菊酯	90.9	4.1	90	11.1	93	6.4
18	氰戊菊酯	89.1	12.24	83.8	18.6	115.2	13.0
19	溴氰菊酯	94.5	5.9	96.5	13.8	113.5	11.5

表4 19种目标农药在油桃基质中的加标回收率和相对标准偏差（n=6）

3 结论

本文对油桃建立了19种农药残留的检测方法，进行了方法学论证，结果表明在QuEChERS方法的基础上，进行提取与净化方面的优化，采用乙腈作溶剂，选取适合有机磷和有机氯类农药的残留分析，提高了提取效率与基质的净化效果，为油桃的安全生长提供了技术支撑。

参考文献:

[1]王雪,王盾,张姝娟,褚乾梅,张倩,朱梦洁,黄大明.气质联用法在测定40种农药残留中的应用[J].湖北农业科学,2019,58(23):171-175.

[2]梁利鹏,丁辉,余河水,张丽娟,宋新波.QuEChERS法结合气相色谱-质谱快速测定人参中33种农药残留[J].辽宁中医药大学学报,2017,19(09):63-67.

附件：

论文 (2).docx