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关于标准曲线绘制过程中总氮高浓度管吸光度值过低的问题

  • Ins_99f1738f
    2024/06/03
  • 私聊

水质检测

  • 实验条件:紫外分光光度计,275波长,10mm石英比色皿,进口过硫,淘宝自购总氮标液(10mg/L),用50ml离心管替代的比色管,消化条件125℃ 30min,水样为养殖水体。
    问题:分别加入3.2ml和4ml氮标液的两根管子,在275波长下,吸光度值错误, 6根标曲管测得吸光度为0.005 0.014 0.018 0.021 0.014 0.016
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  • ztyzb

    第1楼2024/06/03

    应助达人

    实验条件:紫外分光光度计,275波长,10mm石英比色皿,进口过硫,淘宝自购总氮标液(10mg/L),楼主怎么买那么低浓度的标液?浓度低保质期很短的
    用50ml离心管替代的比色管,消化条件125℃ 30min,水样为养殖水体。

    问题:分别加入3.2ml和4ml氮标液的两根管子,在275波长下,吸光度值错误,
    楼主,此处不是很明白,3.2ml和4ml指的是养殖水体的水样吗?吸光值错误有可能是有机物含量过高需要稀释
    6根标曲管测得吸光度为0.005 0.014 0.018 0.021 0.014 0.016
    楼主,个人经验标曲A275都在0.005左右比较合理,其余五个点有些偏高了,可能是实验用水、玻璃器皿、环境条件或者试剂的问题
    另外您可以把整个标曲数据贴一下,含A220和A275

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  • Ins_99f1738f

    第2楼2024/06/03

    感谢您的回复,在思考问题时删改太多,这个“水样为养殖水体”请忽略(非常抱歉
    3.2ml和4ml是我绘制标准曲线时在各比色管中加入的氮标液含量,也就是配置浓度梯度。
    10mg/L标液是书上写的(总氮总磷联合消化紫外分光光度法)
    按照我的理解,这个浓度梯度6根管的吸光度值应该是呈上升趋势的,而我的结果经常是某个高浓度管吸光值低于低浓度管。
    我一开始怀疑是消化不完全,或者是消化过程中被污染,但我提高了消化的温度以及选用了密封性比较好带螺旋盖子的50ml离心管,结果依然不尽人意。
    最后因为在测定275波长“失败”后,我就习惯性处理了,并无存留。(非常抱歉

    ztyzb(zxz19900120) 发表:实验条件:紫外分光光度计,275波长,10mm石英比色皿,进口过硫,淘宝自购总氮标液(10mg/L),楼主怎么买那么低浓度的标液?浓度低保质期很短的
    用50ml离心管替代的比色管,消化条件125℃ 30min,水样为养殖水体。

    问题:分别加入3.2ml和4ml氮标液的两根管子,在275波长下,吸光度值错误,
    楼主,此处不是很明白,3.2ml和4ml指的是养殖水体的水样吗?吸光值错误有可能是有机物含量过高需要稀释
    6根标曲管测得吸光度为0.005 0.014 0.018 0.021 0.014 0.016
    楼主,个人经验标曲A275都在0.005左右比较合理,其余五个点有些偏高了,可能是实验用水、玻璃器皿、环境条件或者试剂的问题
    另外您可以把整个标曲数据贴一下,含A220和A275

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  • ztyzb

    第3楼2024/06/04

    应助达人

    Ins_99f1738f(Ins_99f1738f) 发表: 感谢您的回复,在思考问题时删改太多,这个“水样为养殖水体”请忽略(非常抱歉
    3.2ml和4ml是我绘制标准曲线时在各比色管中加入的氮标液含量,也就是配置浓度梯度。
    10mg/L标液是书上写的(总氮总磷联合消化紫外分光光度法)这个作为原液的话浓度确实低了,建议购买高浓度自己配
    按照我的理解,这个浓度梯度6根管的吸光度值应该是呈上升趋势的,而我的结果经常是某个高浓度管吸光值低于低浓度管。
    我一开始怀疑是消化不完全,或者是消化过程中被污染,但我提高了消化的温度以及选用了密封性比较好带螺旋盖子的50ml离心管,结果依然不尽人意。
    最后因为在测定275波长“失败”后,我就习惯性处理了,并无存留。(非常抱歉
    楼主,绘制标曲吸光值随浓度上升没问题,但是对于总氮来说测定波长并不是275nm,最终吸光值是A220-A275,即220nm处吸光值减去2倍275nm处吸光值,而275nm处吸光值是为了消除干扰的

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