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【我们不一YOUNG】菌落总数测定菌落计数需注意的事项
城头变幻大王骑
2024/07/27
私聊
食品毒素/微生物检测
(1)如果稀释度大的平板上菌落数反比稀释度小的平板上菌落数高,则系检验工作中发生的差错,属实验室事故。此外,也可能因抑菌剂
混入样品中所致,均不可用作检样计数报告的依据。
(2)如果平板上出现链状菌落,菌落之间没有明显的界限,这是在琼脂与检样混合时,一个细菌块被分散所造成。一条链作为一个菌落计,如有来源不同的几条链,每条链作为一个菌落计,不要把链上生长的各个菌落分开来数。此外,如皿内琼脂凝固后未及时进行培养而遭受昆虫侵入,在昆虫爬过的地方也会出现链状菌落,也不应分开来数。
(3)如果所有平板上都有菌落密布,不要用多不可计作报告,而应在稀释度最大的平板上,任意数其中2cm2个,除2求出每cm2内平均菌落数乘以皿底面积63.6cm2数,再乘其稀释倍数
作报告。例如10-1~10-3稀释度的所有平板上均菌落密布,而在lO-3稀释的平板上任数2个cm2。内的菌落数是60个,皿底直径为9cm,则该检样每g(或m1)中“估计”菌落数为:60/2×63.6×1000=1908000或1.9×106。
63.6cm2数系按皿底直径为9cm时计算而得,即:(9/2)2×3.14=63.6;如所用平皿的皿底直径不是9cm,则可按其直径的实际cm数代人圆面积公式求出。
(4)菌落计数中,如能使用菌落计数器
,则比较方便,灯光由侧面射向平板,菌落易于观察。由于仪器带有电子音响讯号,用特制金属探笔点数中,在发出音响之下始显示数字增加,不会发生差错。且灯光与平板之间夹有多用方格玻质规板(方格面积为lcm2),也有助于对菌落密布的平板进行计数。
(5)检样如系微生物类制剂(如酸牛乳、酵母制酸性饮料),则平板计数中应相应地将有关微生物(乳酸杆菌、酵母菌)排除,不可并入检样的菌落总数内作报告。一般在校正检样的pH7.6后,再进行稀释和培养,此类嗜酸性微生物往往即不易生长。并可用革兰氏法染色鉴别。染色鉴别时,要用不校正pH的检样做成相同稀释度的稀释液培养所生成的菌落涂片染色作对照,以资辨别。酵母菌卵圆形,远比细菌大,大小为2~5×5~30μm,革兰氏阳性
着色。乳酸杆菌在24小时内,于普通营养琼脂平板上在有氧条件下培养,通常是不生长的。
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