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【我们不一YOUNG】麦氏比浊管具体应该怎么使用
城头变幻大王骑
2024/07/27
私聊
食品毒素/微生物检测
麦氏比浊管具体应该怎么使用呢?
操作方法
2、无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径(大小)的无菌试管中。
3、以无菌操作向被测定试管加入无菌生理盐水(NaCl),直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。
4、直接用眼睛看(需要经验,误差较大)。
5、找张白纸,打上平行直线,然后观察读数(如图示,利用光在不同浓度液体折射不同)。
例如,需配大约100cfu/mL 的细菌菌液浓度:
1. 无菌操作用
接种环
挑取测试细菌的纯培养物到盛有一定量无菌生理盐水管中,混悬。
2. 以比色卡作为背景目测,直到浊度与0.5 麦氏比浊标准管的浊度相一致,如上图所示。
3. 0.5 号麦氏浊度标准管相当于1×108CFU/mL 浓度,以此为参照值,取1mL 浊度跟0.5 号麦氏浊度标准管相一致的菌悬液到9mL 无菌生理盐水管中,作10 倍梯度稀释107、106、105……,102 稀释度含菌量大约为100cfu/mL。
注:1. 测试菌的纯培养物可以是冻干菌株复苏后纯培养物。
2.本法仅供细菌液浓度的粗略计算。
注意事项:
1、如果测定的肉汤培养物不澄清,由培养物的值减去未接种培养基的值来校正细菌浓度。
2、如果肉汤颜色很深,把未接种试管放在标准管的后面读数即可。
3、测定好的细菌,最好做一下梯度稀释涂布计数。
4、此种方法测定的准确性不是很高,如果是对细菌数量要求较精确的,请用
紫外分光光度计
。
5、麦氏比浊液应放室温暗处保存,用前混匀,有效期为6个月。应用时为了准确也可以使用比浊仪但一定要防止麦氏浊度标准管未摇匀或已过期失效。
在微生物学检验中,
麦氏比浊法常作为细菌鉴定、实验配制菌液时大致判断菌液浓度的一种方法,
通常认为,如将配菌液浓度配成0.5麦氏比浊管时,相当于1.0×108细菌数/ml,由于方法本身就是一种估计的方法,所以尽管不同细菌大小差异很大,但除了真菌孢子,细菌的差别不大,结果不会有影响。
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