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【“仪”起享奥运】显微鉴别淫羊藿叶的性状方法

中药/天然药检测

  • 性状及微性状鉴别

    对同一品种不同产地的淫羊藿干燥叶分别进行3次取样并观察。将样品表面清理干净,选取所需部位备用,在叶片基部徒手制作主脉的横剖面。将叶片与主脉横剖面分别放置于拍摄台上,使用单反相机和微距镜头,并结合景深扩展技术,收集实验样品同一位置、不同景深影像数据(每个位置30~50张图片),再使用Helicon Focus Pro7.7.0专业版聚焦堆叠软件得到高清全息彩色图像数据。

    显微鉴别

    表皮制片 取完整叶片参照2020年版《中国药典》四部通则2001显微鉴别法,采取定位取材、徒手切片法获取观察切片,于显微镜下观察,并用相机收集图像数据。
    横切面制片 分别选取淫羊藿叶片的上、中、下3部分,用剪刀分割成小块,于酒精乙酸福尔马林混合液(FAA)固定液中固定48h后漂洗,体积分数1%番红(体积分数50%乙醇配制)染色,乙醇和二甲苯进行脱水透化,经二甲苯溶液透明后浸蜡包埋;蜡块用纯水浸泡后切片,郝氏粘贴剂贴片,50℃下保存2d,用二甲苯进行脱蜡处理;体积分数0.5%固绿染液(体积分数95%乙醇配制)染色,中性树胶封片。分别置于显微镜下,采用正常光明场和偏振光暗场对比观察法,并收集图像数据。
    粉末制片 样品粉碎过筛,参照2020年版《中国药典》四部通则2001显微鉴别法制片,于显微镜下观察,并收集显微图像数据。
    样品测量 将样品置于显微物镜下,用相机收集清晰的完整叶片图像,利用ImageJ的角度测量工具测量叶边缘刺的角度;选取叶上表皮细胞制片,用目镜测微尺测量叶上表皮细胞波状深度占比(上表皮细胞边缘两波峰中间点至波谷的距离,除以两波峰中间点经过波谷延伸至另一边细胞边缘的距离);选取有乳突的淫羊藿叶下表皮制片,用相机收集清晰的显微图片,利用Adobe Photoshop截取像素大小相同的区域,将图片导入ImageJ,调整阈值,去除背景后,利用Analyze Particles插件自动分析,得到乳突密度(淫羊藿叶下表皮单位面积内乳突面积/淫羊藿叶下表皮单位面积×100%);以上数据,不同品种均随机选取测量20次。
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  • xiahuanihao

    第1楼2024/08/07

    中药淫羊藿叶很出名。

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