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在跑空白时一直在最后10min出现非常大的峰,更换柱子和流动相都任存在,求大神指导

  • Insm_e8c8a8e4
    2024/09/02
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 流动相A: 乙腈:四氢呋喃:一级水=80:20:900
    流动相B: 乙腈:四氢呋喃:一级水:560:140:300
    流动相都用三氟乙酸调pH到3.0

    用waters跑空白的情况下在最后10min一直出现一个很大的峰,已经更换了新的流动相,并且换过柱子试过,都存在相同的问题,并且只用只用这个方法时会出现,其它方法是正常的,请大神帮看一下
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  • ztyzb

    第1楼2024/09/03

    应助达人

    楼主,根据您的描述感觉像是方法的问题,跑标准品怎么样?

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  • Insm_e8c8a8e4

    第2楼2024/09/03

    跑标品也是出峰不正常并且最后的那个大峰还是存在,换了新柱子也是这样,会不会是仪器管路的污染,这套方法已经用来很久了,以前一直都是没有问题的,还有一个问题是现在UV一直跳379nm有气泡,要求重新校准,会不会是uv的问题

    ztyzb(zxz19900120) 发表:楼主,根据您的描述感觉像是方法的问题,跑标准品怎么样?

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  • ztyzb

    第3楼2024/09/03

    应助达人

    楼主,您上面的描述是跑其它方法都没有问题,如果管路污染的话不会这样,另外UV灯自检结果如何?

    Insm_e8c8a8e4(Insm_e8c8a8e4) 发表: 跑标品也是出峰不正常并且最后的那个大峰还是存在,换了新柱子也是这样,会不会是仪器管路的污染,这套方法已经用来很久了,以前一直都是没有问题的,还有一个问题是现在UV一直跳379nm有气泡,要求重新校准,会不会是uv的问题

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  • Insm_e8c8a8e4

    第4楼2024/09/03

    UV就是出现379nm可能有气泡,需要重新校准的提示,看操作手册要重新校准一下,但是这个问题会导致380nm一直能测的峰吗?另一个实验,我们换成其他的方法在338nm跑就是正常,UV我们还自己校准不了,只能通知工程师了

    ztyzb(zxz19900120) 发表: 楼主,您上面的描述是跑其它方法都没有问题,如果管路污染的话不会这样,另外UV灯自检结果如何?

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  • ztyzb

    第5楼2024/09/03

    应助达人

    楼主,379nm和380nm波长相邻,肯定是有影响的。

    Insm_e8c8a8e4(Insm_e8c8a8e4) 发表: UV就是出现379nm可能有气泡,需要重新校准的提示,看操作手册要重新校准一下,但是这个问题会导致380nm一直能测的峰吗?另一个实验,我们换成其他的方法在338nm跑就是正常,UV我们还自己校准不了,只能通知工程师了

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  • Insm_e8c8a8e4

    第6楼2024/09/04

    好的,十分感谢

    ztyzb(zxz19900120) 发表: 楼主,379nm和380nm波长相邻,肯定是有影响的。

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  • xiaolanzi5

    第7楼2024/09/04

    应助达人

    我感觉还是流动相的问题,可能流动相含有强保留的杂质,在梯度后期强洗脱的条件下,洗下来了。

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  • dadgoh

    第8楼2024/09/05

    应助达人

    改变梯度,看强吸收是否有变化。以证明这套流动相走梯度不良。需要换试剂批号再试试。

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  • 液相色谱柱修复

    第9楼2024/09/05

    25.101min处的梯度最好调整一下。这个就是梯度峰

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  • hujiangtao

    第10楼2024/09/07

    应助达人

    是不是有极性很弱得组分或基质

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