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【金秋计划】结合网络药理学和microRNA微阵列分析，鉴定miRNA在大黄蜇虫丸治疗血栓形成中的作用

城头变幻大王骑

2024/09/04

中药/天然药检测

血栓性疾病是世界范围内导致死亡的主要原因，抗凝和溶栓治疗是血栓形成的常规治疗和预防方法。然而，出血等副作用仍然是一个根本性的挑战，迫切需要改善治疗策略。

大黄蜇虫丸(DHZCP)出自《金匮要略》，由熟大黄、土鳖虫、水蛭、虻虫等12种中药组成。DHZCP在临床上可用于治疗多种疾病，如癌症、肝纤维化、矽肺、血栓性疾病。研究表明，DHZCP能有效消除动脉粥样硬化斑块，降低总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白浓度，提高高密度脂蛋白浓度，降低血黏度，抑制血小板活化。在脑梗死急性期，DHZCP发挥辅助治疗作用，促进神经功能恢复，下调CD62P表达，降低血栓形成风险，缓解血液高凝状态。然而，以往的研究仅关注DHZCP抗血栓形成的临床疗效和相关指标的变化，其分子机制有待进一步探索。该研究旨在从生物信息学和miRNA方面探讨DHZCP治疗血栓形成的潜在机制。

采用网络药理学方法探索DHZCP治疗血栓形成的靶点，并通过微阵列分析获得DHZCP治疗凝血酶刺激的MEG-01细胞的miRNA谱，预测靶基因。基于靶点的重叠，进行了组分-靶点- miRNA网络和富集分析，并使用定量逆转录-聚合酶链反应验证了所选的miRNA和mRNA。

DHZCP的230种有效成分中有850个靶点，1214个血栓相关基因；235个靶点是共同的。在MEG-01细胞中发现了32个受凝血酶刺激调控但受DHZCP处理反向调控的miRNA，并通过功能注释预测了1846个靶点。联合分析了23个来自网络药理学和微阵列的整合靶点。HIF1A、PIK3CA、MAPK1和BCL2L1是网络图中的关键节点。证实了7种miRNA、1种mRNA (BCL2L1)和血小板表面蛋白的差异表达。

该研究表明，在DHZCP干预血栓形成过程中，miRNAs及其靶点如BCL2L1在血小板活化中发挥了至关重要的作用，突出了其缓解血小板活化和增加细胞凋亡的潜力。这项研究的发现可能有助于开发改善血栓治疗的新策略。

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