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液相色谱(LC)
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液相色谱中流动相的选择原则
p3203140
2024/09/08
私聊
液相色谱(LC)
1.尽量选择毒性小的溶剂,我们应该了解常用试剂的
MSDS
,尤其了解其毒性以及如何处理突发情况。
2.然后我们选的溶剂之间是相互互溶的。
3.
与检测器匹配:紫外:流动相的截止波长要低于样品的检测波长;
RI
:流动相的折光系数与样品的差异较大;
ELSD
:挥发性或受热分解成气体的流动相;质谱:能促进相应离子源模式下化合物的电离。
4.
粘度低:高粘度溶剂会影响传质和扩散,降低柱效,柱压会高。
5.
流动相
pH
:反相模式下,对于可电离的化合物,应调节流动相
pH
使待测物不电离,处于分子状态。一般酸性分析物使用流动相
pH
比分析物酸度系数更低的流动相,碱性分析物使用流动相
pH
比分析物酸度系数更高的流动相。
6.
流动相中的缓冲盐:应考虑缓冲盐在有机相中的溶解度,一般运行梯度不会超过
70%
有机相,防止泵头处盐析,应考虑将
B
相配制成有机相与水混合溶液。
7.
离子对试剂能不用尽量不用,如果用的话,尽量专柱专用,因为离子对会使色谱柱填料改性。
8.流动相的纯度,HPLC用色谱纯有机相,水用二次纯水或屈臣氏蒸馏水,质谱需用质谱纯的有机相和水。
9.不能对色谱系统造成损坏,比如二氯甲烷会腐蚀泵的金属组件,可与其他试剂预混后使用,用完要及时置换系统;碱性流动相会对普通色谱柱的硅胶溶解塌陷,有机杂化的硅胶对碱性环境的稳定性更好一些。
10.不对样品造成破坏。
另外对于制备色谱的流动性有两点补充:
1.对样品有一定的溶解性,如果对样品的溶解性差,会导致样品析出,会影响分离,甚至堵塞进样器或色谱柱。
2.挥发性好、沸点低,利于分离后的馏分后处理。
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