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【金秋计划】+水质对高效液相色谱法(HPLC)的影响?
memory光阴
2024/09/10
私聊
液相色谱(LC)
HPLC
最常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。
颗粒:
颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并且熔化它,这会导致回压增大。颗粒还会表现为另一种固相,可能改变样品的组分。
有机物:
超纯水中的有机物可能影响色谱峰的分离度和积分、可能导致鬼峰、还可能改变固定相的选测性以及影响色谱基线。
离子:
离子浓度的改变会影响分离结果,部分能吸收
UV
的离子会对峰产生影响。某些有腐蚀性离子的还会降低高压输液泵等配件的使用寿命。
胶体:
胶体会不可逆的吸附在固定相上面,影响柱的分离效果。
微生物:
微生物会堵塞色谱柱,其代谢产物会增加有机物,颗粒等污染物。
瓶装纯净水和蒸馏水:
目前部分
HPLC
分析中使用的纯净水,由于瓶装纯净水和蒸馏水均只是普通纯水而不是超纯水,水中仍含有少量离子和有机物等杂质,用以配制
液相
和洗脱液不仅可能污堵昂贵的色谱柱,也影响
HPLC
定出平坦的基线。
瓶装纯净水的纯化工艺:
通常包括吸附、过滤、反渗透等,对颗粒性有机物的去除效果较好,但对微量离子及有机物的去除却不能满足高灵敏度的
HPLC
实验之需求,并且,由于其包装通常多为
PVC
瓶,透氧率高,同时存在一定的化学溶出量,从而污染瓶中的纯净水,尤其是保存一段时间后,水质下降更多,因此表现在
HPLC
色谱图上,虽无特定吸收峰,但基线存在较严重的不稳干扰。
蒸馏水:
是指用蒸馏方法制备的纯水。可分一次和多次蒸馏水。水经过一次蒸馏,不挥发的组分残留在容器中被除去,挥发的组分进入蒸馏水的初始馏分中,通常只收集馏分的中间部分,约占
60
%,要得到更纯的水,可在一次蒸馏水中加入碱性高锰酸钾溶液,除去有机物和二氧化碳;加入非挥发性的酸(硫酸或磷酸),使氨成为不挥发的铵盐。通过对双蒸水进行
HPLC
检测时发现,
254nm
和
214nm
在
22
~
27
分钟时都出现较强的吸收峰,这表明有疏水性较强的有机物污染,其原因应是蒸馏过程的共沸现象导致了某些挥发性有机物去除不
*
。
超纯水机:
综合了反渗透、离子交换、活性炭吸附、膜过滤、超滤及紫外光氧化等多种纯化工艺,产水电导率达到
18.2MΩ?cm
,产水水质超过国标一级水标准且稳定可测,超纯水即取即用,不会因储存引入污染,水质有保证,较之使用瓶装纯净水或蒸馏水,更能满足用户高精度仪器分析的需要。
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