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第1楼2024/09/14
半制备液相色谱仪(Semi-preparative Liquid Chromatography, SLP)主要用于分离和纯化中等规模的样品,其原理与分析型液相色谱相似,但是使用了更大的色谱柱和更高的流动相流量,以便能够处理更多的样品并收集目标化合物。下面是半制备液相色谱仪的基本工作原理:
### 工作原理
1. **进样**:样品通过进样阀(通常是六通阀)被注入到色谱系统中。样品的体积相对较大,以便能够收集足够的纯化产物。
2. **分离**:样品进入色谱柱后,不同组分根据其物理化学性质(如极性、大小、形状等)与固定相之间的作用力不同,在柱中被分离。分离过程依赖于流动相(也称为洗脱剂)推动样品通过柱子。
3. **检测**:分离后的组分依次流出色谱柱并进入检测器。常用的检测器包括紫外检测器(UV)、荧光检测器(FLD)、蒸发光散射检测器(ELSD)等。检测器记录下不同组分随时间变化的信号强度,形成色谱图。
4. **收集**:目标化合物在特定的保留时间内流出,此时可以通过收集器收集相应的流出液。收集方式可以是手动的也可以是自动化的,取决于实验室的具体设置。
5. **纯化**:收集的目标化合物理论上应该是单一的成分或具有非常相近性质的一组化合物。收集后的样品可以进一步分析或用于后续实验。
### 主要特点
- **柱尺寸**:相比于分析型液相色谱,半制备液相色谱使用直径更大、长度更长的色谱柱,以便能够承载更多的样品。
- **流动相流量**:为了适应较大的柱体积和样品量,半制备液相色谱使用的流动相流量也较高。
- **压力**:由于柱尺寸增加,为了保持适当的流速,系统需要承受更高的压力。
- **收集系统**:通常配备有自动化收集系统,可以根据预设的时间或体积参数自动收集目标组分。
### 应用领域
半制备液相色谱广泛应用于药物合成、天然产物提取、生物制药等领域中的化合物分离与纯化,尤其是在药物开发过程中,用于纯化候选药物分子。
半制备液相色谱是连接分析型液相色谱与制备型液相色谱的一个中间环节,适用于那些需要较大量纯化物质但又不至于达到大规模生产的场景。