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用酶抑制法检测有机磷农药残留,如何绘制标准曲线
勤能补拙,拙能生巧,我也是
2024/09/22
私聊
农残检测
用酶抑制法检测有机磷农药残留的时候,标准曲线的制备是非常重要的,我们来看看如何制备吧。
首先呢,得准备一些东西。要有乙酰胆碱酯酶,这就像个小侦探,能帮我们检测农药残留。还有显色剂,等会儿它会帮我们看出有没有反应。再有就是缓冲液,让整个反应在一个稳定的环境里进行。另外,还得准备不同浓度的有机磷农药标准溶液,从低浓度到高浓度都要有哦。
再拿几个干净的小杯子,就是比色皿啦。在每个比色皿里倒上一点缓冲液,接着加上同样多的乙酰胆碱酯酶。这时候呢,再往不同的比色皿里倒上不同浓度的标准溶液。加完标准溶液后,再倒上显色剂,赶紧搅拌均匀。
接着把这些比色皿放进分光光度计里。先测一下一开始的吸光度值,记下来。然后让它们在合适的温度下反应一会儿。等反应完了,再测一次吸光度值。
有了这两次吸光度值,就能算酶抑制率啦。用一开始的吸光度值减去反应后的吸光度值,再除以一开始的吸光度值,然后乘以 100%,这就是酶抑制率。
算完每个比色皿对应的酶抑制率后,就有了一组数据。把不同浓度的标准溶液和对应的酶抑制率写在纸上。然后以标准溶液的浓度为横坐标,酶抑制率为纵坐标,在纸上画个图。可以用铅笔轻轻地画点,把每个数据点都标出来。
标完点后,可以试着画一条线,把这些点连起来。如果画得好,这条线就会比较平滑。要是不太好画,也可以用电脑软件来帮忙,让它给咱拟合出一条线来。
画好线后,得看看这条线好不好。要是线比较直,说明浓度和酶抑制率的关系比较好。要是歪歪扭扭的,那就得想想是不是哪儿出问题了,可能得重新做实验。
这样呢,标准曲线就画好啦。等检测实际样品的时候,看看样品的酶抑制率,在标准曲线上找对应的浓度,就能知道样品里有多少有机磷农药残留啦。
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