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线性的截距很大，怎么办？

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2024/10/18

液相色谱（LC）

线性的截距很大，怎么办？

问题：工作中很多时候，我会以峰面积来判定主峰是否超载，比如主峰面积在1000万（Waters仪器）以下，线性应该不会有问题，那么这种判定一定对吗？

案例1

某化合物有关物质采用200nm作为检测波长，供试品浓度为1.0mg/mL，进样体积为5uL，方法采用面积归一化法*校正因子法计算杂质，由于客户提供的方法，时间很紧，也就没调整波长了.

线性方程如下：

指数方程如下：

从上可知，随着浓度增加，响应因子一直在呈降低趋势，在低浓度较窄的浓度范围内呈线性，如果用峰面积来简单判定是否超载（比如1000万）或是否呈线性，风险很大，工作中需要注意，尤其检测波长选择在紫外吸收很强的波长处，这个方法波长选择太低，化合物在200nm响应很强，线性范围很窄，线性范围需要控制在0.05mg/mL以下，方法定的1mg/mL，UV已经严重超载，不呈线性，杂质计算采用1%自身对照法计算，否则杂质含量均偏大。

当线性截距很大的时候，需要考虑UV超载了，线性范围需要收窄了。

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