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高效液相色谱|示差检测器(RI)小知识
p3203140
2024/10/18
私聊
液相色谱(LC)
示差折光检测器(Differential Refractive Index Detector,简称RID)是一种
液相色谱
(HPLC)中的通用型检测器,它基于连续测定样品流路和参比流路之间折射率的变化来测定样品含量的。这种检测器对所有溶质都有响应,特别适用于检测某些不能用选择性检测器检测的组分,如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等。
1、
工作原理
示差折光检测器的工作原理:当光从一种介质进入另一种介质时,由于两种物质的折射率不同就会产生折射。检测器设计中,样品池和参比池中液体的示差折光不同会引起光束偏转程度的变化,从而被检测。
来自灯源(典型的是鸽灯)的光导人一对模形的流通池。其中一个流通池用作参比池,一般含有(静态的)流动相样品;柱子洗脱液则导人样品池。当光通过检测池时,它的折光率会发生变化,取决于流通池的即时条件。光通过流通池时折光率的变化由一对光电二极管测量,并且随后转变为电压输出。传统的阳检测器使用两个光电二极管,如图a所示。如果样品溶液的折光率发生变化,光也会随之发生偏转,因此到达光电二极管的光量也会发生改变。最新用在RI检测器上的光电二极管阵列技术允许同时使用多个光电二极管进行检测,如图 b所示。
2、检测器的局限性
灵敏度相对较低
:示差折光检测器对多数物质的灵敏度较低,大约在10
-5
g/ml,通常不用于痕量分析。这意味着对于一些需要高灵敏度检测的应用,示差折光检测器可能不是最佳选择 。
受环境温度影响较大
:
示差折光检测器的性能容易受到环境温度波动的影响,这可能会影响基线的稳定性和测量的准确性。因此,在使用示差折光检测器时,需要对实验室或仪器的温度进行严格控制。
不适合梯度洗脱
:
示差折光检测器不适合与梯度洗脱方法结合使用。由于梯度洗脱会改变流动相的组成,这可能会对检测器的读数产生较大影响,导致结果不准确。
平衡时间较长
:
示差折光检测器达到稳定状态所需的平衡时间较长,这可能会延长分析时间,影响工作效率。
对流动相有一定要求
:
示差折光检测器对流动相的组成有一定的要求,流动相的折光指数变化可能会影响检测结果。因此,在选择流动相时需要考虑其对检测器性能的影响。
[/quote]
Part 3
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