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线性的截距很大,怎么办?
p3203140
2024/10/18
私聊
液相色谱(LC)
线性的截距很大,怎么办?
问题:工作中很多时候,我会以峰面积来判定主峰是否超载,比如主峰面积在
1000
万(
Waters
仪器)以下,线性应该不会有问题,那么这种判定一定对吗?
案例
1
某化合物有关物质采用
200nm
作为检测波长,供试品浓度为
1.0mg/mL
,进样体积为
5uL
,方法采用面积归一化法
*
校正因子法计算杂质,
由于客户提供的方法,时间很紧,也就没调整波长了.
线性方程如下:
指数方程如下:
从上可知,随着浓度增加,响应因子一直在呈降低趋势,在低浓度较窄的浓度范围内呈线性,
如果用峰面积来简单判定是否超载(比如
1000
万)或是否呈线性,风险很大
,工作中需要注意,尤其检测波长选择在紫外吸收很强的波长处,这个方法波长选择太低,化合物在
200nm
响应很强,线性范围很窄,线性范围需要控制在
0.05mg/mL
以下,方法定的
1mg/mL
,
UV
已经严重超载,不呈线性,杂质计算采用
1%
自身对照法计算,否则杂质含量均偏大。
当线性截距很大的时候,需要考虑
UV
超载了,线性范围需要收窄了。
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