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液相色谱(LC)
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为什么保留因子k值在1-10范围内会比较好?
p3203140
2024/10/24
私聊
液相色谱(LC)
在
《现代
液相色谱
技术导论》
P13-P14
页,提出了保留因子
k
的定义:化合物在固定相和流动相中的质量比,最终推导后得出以下公式:
书中提了一句“本章节2.4.1中可以看到,由于众多的原因,k值介于1和10之间是最合适的”,那么这个“众多原因”,去翻章节2.4.1,基本都是理论计算居多,估计还不一定看懂,那么就听小编计算后告诉你“众多原因”是啥?
1、
为什么k值在1-10范围内会比较好?
以色谱柱:C18 250*4.6mm 5um为例计算,死体积约为空管体积的65%,则死体积为:Π*r
2
*
L*0.65=3.14*(0.46/2)
2
*25*0.65=2.699cm
3
,如果流速为1mL/min,则死时间t
0
=2.699/1≈2.5min。
大部分方法的分析时间都会控制在1个小时之内,太长了效率低,假如目标化合物t
R
为分别为50min和25min,则k就约等于50/2.5=20和10,如果k值为1,由(1)式可知,代表化合物保留时间t
R
为5min,k越接近0,代表化合物越无保留,在死时间出峰,为了分离化合物,必须让化合物有保留,也就是第一个峰保留时间t
R
需要在5min以上,即k在1以上,为了提高分析效率,最迟目标峰保留时间不晚于25min(此时k为10,加上平衡时间也就越30min一针),这就是1-10的来源。说白了就是为了提高分析效率,利益最大化,因为在增加化合物的保留时间(k增大),对分离度的改善贡献很低了,没必要在浪费过多的时间和精力。
也有部分方法主峰保留时间很长,曾经见过120min一针的方法,当时是因为主峰出来后,后面还有一个较大的杂质,需要100%甲醇冲好久才能洗脱,k值会大,当然这种方法比较少,是那20%。
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