第1楼2005/01/25
酶联免疫方法:德国r-biopharm制造 010-58772871/72/73/74/75/76
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样品处理
样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存
9.1虾,肉样(鸡肉、猪肉和牛肉),肝脏,鱼和蛋
----用均质器均质样品
----接9.3的描述方法
9.2 奶样
----取出5ml的样品到玻璃离心管中
----分别加入Carrez I和CarrezII各250ul(配制见5.2)
----用振荡器充分混合样品后,用冷冻离心机离心3000g/10分钟/4-12℃(39-54℉)。如果没有冷冻离心机,则先将样品降温至大约8 ℃(46℉),然后离心
----接9.3的描述方法
9.3 接上面的方法
----取1g的均质物或1.1ml的离心上清液(相当于1ml的奶样),分别加入4ml的蒸馏水, 0.5ml 1M的HCL和100ul 10mM的2-硝基苯甲醛(在二甲基亚砜),充分振荡
----在37℃过夜孵育(大约16小时)
----分别加入5ml 0.1M K2HPO4,0.4ml 1M NaOH和5ml的乙酸乙酯,剧烈振荡30秒钟
----在室温下(20-25 oC/68-77℉)离心:3000g/10分钟
----取出2.5ml的乙酸乙酯上层液到另一个新的容器中蒸干燥
----用1ml的正己烷(或正庚烷)溶解干燥物,用1ml的样品稀释液适当的混合
----在室温下(20-25 oC/68-77℉)离心:3000g/10分钟
----用50ul的下层液体进行分析
9.4蜂蜜
----取1g的蜂蜜,放入容量为20-30ml的离心管中,分别加入5ml的己烷,100ul 5M的HCL(或500ul 1M的HCL)和4ml的H2O,充分振荡约1min
----室温(20-25℃)3000g,离心10分钟
----在-80℃冷冻30 min(或—20℃冷冻1h)
----除去上层
----在50℃水浴下,复溶冷冻层
----加200ul 10mM的2-硝基苯甲醛(溶于二甲基亚砜),充分振荡
----在37℃过夜孵育(大约16小时)。
----分别加入5ml 0.1M K2HPO4,0.4ml 1M NaOH和5ml的乙酸乙酯,剧烈振荡1min
----室温(20-25℃)3000g离心10分钟
----取2.5ml的乙酸乙酯层到另一个试管中,50-60 ℃氮气流下蒸干
----用1ml的样品稀释液溶解干燥物,剧烈振荡1min
----取50ul 进行分析
稀释倍数: 2
检测下限: 150ppt