【讨论】我在使用酶标仪时遇到的问题

tianru的爸爸 2007/06/24

[quote]原文由 [B]menghandna[/B] 发表: 不超过24小时？时间很长，不知道有没有封口，最好不要直接与空气接触。[/quote] [quote]原文由 [B]ruojun[/B] 发表: 试剂会接触空气的,但板井我都放在空气中了.时间从30分钟到3小时不等.错了,要封口呀?温度太低应该会影响抗原抗体吸附吧[/quote] 1、温度低会影响抗原抗体反应的，一般是在37度反应一个固定时间，也有用室温（20度附近）反应一个固定时间（这些时间由自己掌握，固定就行）。 2、板子在不用的情况下，要密封起来，特别是长时间保存，不能让板子完全干透了，会影响将来的抗原抗体的结合。 3、最后酶显色也是很重要的，如果这时的条件不能一致，波动也会增加的；同样也是保持条件一定。 4、一直没有注意到板子回到室温的时间，没注意到它的干扰，只是注意反应的温度与时间：一般是把试剂回复到室温（用手感觉一下）再加试剂，然后再加样/试剂去反应（室温或37度保温）。

家有宝贝儿 2007/06/26

[quote]原文由 [B]ruojun[/B] 发表: 方法是有一个固定的反应时间为30分钟,洗板后再加入成色底物反应30分钟,最后终止反应比色读数.这些过程都一样,唯一的差异是在室温的回温时间和做实验的时间:上午或下午.难道上午或下午温度不同也会导致这么大的吸光度差异?[/quote] 如果连上午和下午都差这么多，这个实验的系统适用性就有问题。 没有其他公司的产品吗？如果有可以试试，不排除试剂盒本身的不稳定性。

一抹冰蓝 2007/07/02

[quote]原文由 [B]dhm7801[/B] 发表: 我只用酶标仪做黄曲霉毒素，那也是要低温的，我一般放在室温中45分钟即开始做实验，只是实验不怎么能再读第二遍，第二遍的数据有差别，所以我想可能和反应的速度有很大的关系。[/quote] 那这样的实验结果可靠吗？实验的重复性，重现性如何？

黄金战士 2007/06/21

ELISA KIT 回温时间应该没有严格要求,一般使抗体和抗原达到最佳活性为好.厂家的使用说明书会标明这些(许多是15分钟以上,但不让超过一天),没的话就询问厂家吗.假如厂家连这一点都确定不了的话,你还敢用他的产品吗?

happy水中月 2007/06/21

[quote]原文由 [B]ruojun[/B] 发表: 我分析的是三聚氰胺。试剂盒要求在低温下保存。使用前在室温下回温后再用。但厂家没有告诉回温时间。所以为快速检测，有时回温时间偏短，有时较长，但总体看回温时间短吸光度低很多，如果读数推迟时，吸光度会在一定时间内逐步增加；相反，如果回温时间长，推迟读数时间，很快吸光度降低。当然，吸光度与浓度的关系仍然明显。[/quote] 应该做回温时间和吸光度的关系考察，找到变化稳定的时间或影响最小的时间才好，否则系统的误差太大了。没有用过，个人观点，不知对否？