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【资料】SCX小柱使用方法,如活化,淋洗,洗脱等条件,急

  • huazhong98
    2007/07/25
  • 私聊

前处理综合讨论

  • 选用的阳离子SCX固相萃取小柱,测肌肉中的卡巴多,和喹乙醇很像,是一种促生长剂,可使用柱子的时候,回收率很低,请问哪位大侠用过这种柱子啊,我查了资料,使用5ML甲醇,5ML水,5ML稀盐酸活化,可样品液过柱损失不小啊,影响回收率,请问前对样品液的PH值要求高吗,还有淋洗和洗脱选用什么比较合适啊,我试了用水和甲醇淋洗,都有损失,郁闷啊
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  • douzaer

    第1楼2007/07/25

    SCX是强阳离子交换柱,一般用于除掉样品中的强阴离子,比如无机离子。
    不是太清楚你做的卡巴多的具体性质,是要把它和什么分离开来呢?你想要的柱保留是目标物还是杂质?
    曾看过一篇东西,估计会对你有帮助。HPLC分离喹乙醇、卡巴多及其代谢物,流动相用的是:甲醇、水和乙酸钠缓冲液(pH 4.6)。供参考
    http://www.instrument.com.cn/journal/magazine/passage_11839.htm


    --锐锋科技,祝您一臂之力

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  • 做牛做马

    第2楼2007/08/23

    固相萃取SPE(Solide Phase Extraction) 是利用吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基质和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱,达到分离或者富集目标化合物的目的。固相萃取实际上采用的是液相色谱的分离原理,分离模式主要包括反相、正相、离子交换和吸附。固相萃取所用的吸附剂与液相色谱常用的固定相相同,只是在填料的形状和粒径上有所区别。一般来讲,固相萃取填料的粒
    径分布较液相色谱柱中的要宽,而且固相萃取小柱是一次性消耗品。
    固相萃取小柱的吸附剂通常装填于聚丙烯柱筒底部,并由上下两层聚丙烯或聚四氟乙烯筛板固定;也有96 孔形式的固相萃取小柱。固相萃取小柱的大小规格、吸附剂的种类及装量都配有多种选择。
    固相萃取小柱使用的基本步骤包括以下5 步
    111  预洗
    预洗是用强溶剂预先淋洗小柱,以消除小柱上在生产或储存过程中可能代入的污染物,当在洗脱溶剂的洗脱力强于活化溶剂时一般要实施这一步。如果产品包装密封并明确注明已进行预洗就无需这一步。
    112  活化
    首先用较强(洗脱能力的) 溶剂润湿吸附剂,而后再以较弱(洗脱能力的) 溶剂润湿小柱,从而保证样品在小柱上有足够的保留。
    113  上样
    选择强度相对较弱的溶剂溶解样品。液体样品被加到SPE 小柱上后,不保留或弱保留的组分随溶剂流出,待测组分和其他强保留组分保留在吸附上。
    114  冲洗
    用不会把待测组份洗脱出来的溶剂(样品溶剂或稍强溶剂) 淋洗小柱,随后通常采用抽真空或高速离心来排除残余溶剂。
    115  淋洗
    用尽量少的较强溶剂将待测组分洗脱出来,而剩余较强的基体组分仍然保留在填料中。对于收集到的淋洗液,可进一步吹干,用适当溶剂定溶,也可用于直接进样。

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  • pingguwu

    第3楼2007/10/04

    你搞错了,SCX不适合做卡巴氧、喹乙醇。

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