【求助】高效液相色谱的评价标准

高效液相色谱是色谱法的一个重要分支。它采用高压输液泵和小颗粒的填料，与经典的液相色谱相比，具有很高的柱效和分离能力。色谱柱是色谱仪的心脏，也是需要经常更换和选用的部件，因此，评价色谱柱是十分重要的。而且对色谱柱的评价也可以检查整个色谱仪的工作状况是否正常。
评价色谱柱的性能参数主要有：
（1） 柱效（理论塔板数）n
　式中tr为测试物的保留时间，W1/2为色谱峰的半峰宽。
（2） 容量因子k’
　式中t0为死时间，通常用已知在色谱柱上不保留的物质的出峰时间作死时间。
(3) 相对保留值（选择因子）α
式中k1’和k2’分别为相邻两峰的容量因子，而且规定峰1的保留时间小于峰2的。
(4) 分离度Rs
　式中tr1、tr2分别为相邻两峰的保留时间，Wb1、Wb2分别为两峰的底宽。对于高斯峰来讲，Wb=1.70W1/2。
为达到好的分离，我们希望n、α和Rs值尽可能大。一般的分离（如α=1.2，Rs=1.5），需n达到2000。柱压一般为104 kPa 或更小一些。本实验采用多核芳烃作测试物，尿嘧啶为死时间标记物，评价反相色谱柱。
【仪器和试剂】
Waters 510高效液相色谱仪（由Waters 510高压输液泵，Rheodyne 7725i进样器，440检测器和记录仪组成）
色谱柱：5 cm×4.6 mm I.D., YWG-C18H37 (ODS)，10 μm
流动相：甲醇－水(80+20)
样品I： 含尿嘧啶 (0.010 mg·mL－1)、萘 (0.010 mg·mL－1)、联苯 (0.010 mg·mL－1)、菲（0.006 mg·mL－1）的甲醇混合溶液；
样品I I：尿嘧啶的甲醇溶液；萘的甲醇溶液；联苯的甲醇溶液；菲的甲醇溶液。溶液浓度约为0.01mg·mL－1；
【实验内容】
（1）准备流动相。将色谱纯甲醇和色谱纯水按比例配制200mL溶液，混合均匀并经超声波脱气后加入到仪器储液瓶中。
（2）检查电路连接和液路连接正确以后，接通高压泵、检测器和记录仪的电源。设定操作条件为：流速1.0 mL·min－1，压力上限2´104 kPa (约3000 psi)，检测波长254 nm（该仪器检测波长已固定），灵敏度0.2 AUFS，记录仪走纸速度1.0 cm·min－1，记录灵敏度为5 mV。开启记录仪走纸开关记录基线。并调节基线到合适位置（一般为距右10%处）。
（3）待基线平稳后（建议观察检测器的读数显示），将进样阀手柄拨到“Load”的位置，使用专用的液相色谱微量注射器取5μL样品注入色谱仪进样口，然后将手柄拨到“Inject”位置，同时按一下检测器的标记按钮，同时计时，记录色谱图。
（4）重复（3）的实验两次。
（5）用同样方法进纯样品的甲醇溶液，确定出峰顺序。
（6）根据三次实验所得结果计算色谱峰的保留时间、半峰宽，然后计算色谱柱参数n、k’，以及相邻两峰的α、Rs
（7）将流速降为0，待压力降为0后关机。

谢谢
但我是想知道对于市场上的LC，他的评价好坏的标准，具体的就是说他的配置他的指标这些方面的

一般有仪器的稳定性、灵敏度、精密度等。还有就是仪器的耐用性。

清楚液相泵和检测器这块的指标吗？

泵主要看耐压程度、流速的精确性。检测器主要看灵敏度、检测线，如果有灯，灯的使用寿命也在考虑之列。

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