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【讨论】浅谈吸光度的范围和误差对测定结果的影响

  • 初学者&九点虎
    2007/09/18
  • 私聊

紫外可见分光光度计(UV)

  • 在分析过程中,俺咨询过很多人,80%人都是做一条标准曲线,然后去测定样品,很少有人关心误差方面的问题.
    在分光分析中,化学条件引起的误差比较大,但之前这个问题已经讨论过,今讨论吸光度测量的误差.很多人都从书上看的,认为吸光度在0.2-0.8之间误差小,在0.434处最小.但不是特清楚理论根据.还有一个问题,如果吸光度在2.0,难道我们就去稀释样品,让其吸光度在0.2-0.8的范围内吗?反之,如果吸光度在0.02,那我们是不是要浓缩样品呢?
    现在希望大家和我一起在理论上来讨论这个问题,或来个辩论.
    正方:如果吸光度不在0.2-0.8之间,我们要去稀释或浓缩样品来进行测量.
    反方: 如果吸光度不在0.2-0.8之间,直接进行测量,因为稀释或浓缩样品产生的误差远远大于直接测量吸光度产生的误差.


    下面我摘一些理论性的东西,以作为讨论的基础.
    在分光光度计中,透射比的标尺是均匀的.吸光度与透射比为负对数关系,即 我想这一点大家都知道.所以吸光度的标尺刻度是不均匀的.因此,对于同一台仪器,读数的波动对透射比来说,应基本为一定值;而对吸光度来说,它的读数则不在为定值.由分光光度计读数标尺上吸光度与透射比的关系可以看出,吸光度越大,读数波动所引起的吸光度误差也越大.
    那么对我们而言,吸光度在什么范围内具有较小的浓度测量误差呢?
    首先我们考虑吸光度A的测量误差与浓度C的测量误差之间的关系.若在测量吸光度A时产生了一个微小的绝对误差dA,则测量A的相对误差Er为:
    1
    由郎伯-比尔定律: 2
    当b为定值时,两边积分得到: 3
    dc就是测量浓度c的微小的绝对误差.两式相除得到:

    可见,C与A成正比,则测量的绝对误差dc与dA也成正比;而测量的相对误差完全相等.
    A与T的测量误差之间的关系如下:

    微分后得

    这也就是为什么很多人说吸光度在0.434最准确的理论根据了.
    很多人都认为在0.2-0.8之间,才能保证测量误差相对较小.
    不过我个人认为,用过去古老的理论来衡量现在先进的仪器,是不是很合适,希望和大家讨论讨论???



    浅谈吸光度的范围和误差对测定结果的影响
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  • 小狗不理

    第1楼2007/09/18

    谢谢楼主,要仔细看看。

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  • 小狗不理

    第2楼2007/09/18

    下面还有没有,感觉没有写完啊。

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  • mifeng7530

    第3楼2007/09/18

    我也正在想这一问题,下载了,谢谢!

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  • 西域飞纱

    第4楼2007/09/18

    0.434是根据使误差最小推导而来的。不同样品误差允许的范围不同,最后得到的最佳吸光度应该也是不同的。吸光度要控制在什么范围内应该看样品的要求而定吧。另外仪器是先进了。但是郎伯比尔定律这条理论是不变的吧。我做紫外也有一年多了,我的吸光度就控制在0.2-0.8范围内,稀了就浓缩,浓了就稀释。

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  • 西域飞纱

    第5楼2007/09/18

    《实验设计与数据处理》刘振学编,化学工业出版社一书中也有提到。另外今年四月份李昌厚教授来我们讲座也说了吸光度控制在0.434附近最好。

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  • zam0825

    第6楼2007/09/19

    俺觉得不要一概而论,不同用户的仪器档次不一样,经验也不一样,样品也不一样,不能使用同一个标准去衡量。能够满足自己的检测要求就可以了。当然了,不宜使检测时吸光度过小或过大。0.2-0.8A只是一个推荐的范围。

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  • 初学者&九点虎

    第7楼2007/09/19

    是啊,有的东西是用公式编辑器编写的,拷贝过来没有显示出来,不知道为什么,问问水怪怎么回事

    xiaogoubuli 发表:下面还有没有,感觉没有写完啊。

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  • robinln2002

    第8楼2007/09/23

    我最近做试验(分光光度法)遇到的是:标准曲线的截距大,斜率小,这样的话,如何解决?而且吸光度最大也仅仅是0.2-0.3。

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  • 初学者&九点虎

    第9楼2007/09/24

    同意,仪器好我觉得相应的测量范围就大,仪器不好就小

    zam0825 发表:俺觉得不要一概而论,不同用户的仪器档次不一样,经验也不一样,样品也不一样,不能使用同一个标准去衡量。能够满足自己的检测要求就可以了。当然了,不宜使检测时吸光度过小或过大。0.2-0.8A只是一个推荐的范围。

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  • tangldy

    第10楼2007/09/26

    此言差矣。同意四楼观点。

    zhouyuhu 发表:同意,仪器好我觉得相应的测量范围就大,仪器不好就小

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