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【求助】紧急求助-液相色谱流动相

液相色谱(LC)

  • 悬赏金额:20积分状态:已解决

  • 液相色谱流动相为:乙腈-水(30:70),水溶液中KH2PO4 浓度为0.68 g /L,十二烷基硫酸钠浓度为0.68 g /L,并且溶液用磷酸调PH为3.0,在配溶液时把KH2PO4和十二烷基硫酸钠混合后调PH 3.0,溶液变成白色浑浊液,加热后溶液澄清了,但是等冷却下来后又变成白色浑浊液,请教各位大虾应该怎么配啊???
    在流动相还热着的情况下我尝试着测了一下样品,但是压力升的很高,晕!!清洗用水和甲醇,但是压力还是降不下来,怎么办啊!!!该用什么清洗?

myj123456 2007/09/27

柱压太大,用80度的热纯净水冲洗,可先将柱子下掉,将管路冲通后,再上柱子,若再不行,可试试将管路反过来接上,同样用80度热水(纯净)冲洗,只要不堵塞,压力应该能下来。

rdpenen 2007/09/28

建议先看看产生白色浑浊是由什么引起的,可以用以下步骤: 1、调酸后变白色,那么酸性多少的时候可以不变白色? 2、如果只用一种缓冲盐,调酸后是否边浑浊? 3、降低其中的一种盐的比例,看是否可以在某个点平衡? 再问一下,你的流动相配置是否正规?检测SOP是否可行?方法是不是法定方法?如果不是法定方法,那么来源是否可靠?

青橄榄 2007/10/01

?[em09]问一下,你的流动相配置是否正规?检测SOP是否可行?方法是不是法定方法?如果不是法定方法,那么来源是否可靠

wuwenru 2007/09/28

建议降低十二烷基硫酸钠的浓度。压力上升的原因应该和流动相有关,改用单纯的甲醇:水体系跑下基线,如果压力还是很大,就可能是柱子和系统堵塞。这就可是试试用低流速(0.2ml/min),低浓度甲醇(5%),将流动相浸泡在60度的水中,冲洗系统。 如果反过来冲的话,容易弄坏柱子。

子非鱼 2007/09/28

用二通代替柱子看压力是否仍大,若仍大就应该先解决泵的问题,若变小就是柱子堵了。试试用10%乙腈冲洗,然后把柱温升到它说明书上的最高限,持续段时间看有没有效果。不行就把柱子反过来冲吧,虽然会损失掉部分柱效,但能挽回一根柱子也是值得的。

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  • myj123456

    第1楼2007/09/27

    你试试用专用的过滤膜过滤一下,可能能行。

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  • myj123456

    第2楼2007/09/27

    柱压太大,用80度的热纯净水冲洗,可先将柱子下掉,将管路冲通后,再上柱子,若再不行,可试试将管路反过来接上,同样用80度热水(纯净)冲洗,只要不堵塞,压力应该能下来。

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  • wuwenru

    第3楼2007/09/28

    建议降低十二烷基硫酸钠的浓度。压力上升的原因应该和流动相有关,改用单纯的甲醇:水体系跑下基线,如果压力还是很大,就可能是柱子和系统堵塞。这就可是试试用低流速(0.2ml/min),低浓度甲醇(5%),将流动相浸泡在60度的水中,冲洗系统。
    如果反过来冲的话,容易弄坏柱子。

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  • 子非鱼

    第4楼2007/09/28

    用二通代替柱子看压力是否仍大,若仍大就应该先解决泵的问题,若变小就是柱子堵了。试试用10%乙腈冲洗,然后把柱温升到它说明书上的最高限,持续段时间看有没有效果。不行就把柱子反过来冲吧,虽然会损失掉部分柱效,但能挽回一根柱子也是值得的。

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  • Easy-Boy

    第5楼2007/09/28

    将柱温加到80度,用水冲,将压力降下来,之后建议降低十二烷基硫酸钠的浓度为0.34g/L,配制后在过滤一次。估计能行。

    wuwenru 发表:建议降低十二烷基硫酸钠的浓度。压力上升的原因应该和流动相有关,改用单纯的甲醇:水体系跑下基线,如果压力还是很大,就可能是柱子和系统堵塞。这就可是试试用低流速(0.2ml/min),低浓度甲醇(5%),将流动相浸泡在60度的水中,冲洗系统。
    如果反过来冲的话,容易弄坏柱子。

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  • 浅水游鱼

    第6楼2007/09/28

    过滤后看底部是不是有肉眼可见的小渣子,有时滤不净的,原来你出现的问题就是没滤好,出现浑浊不怕,就怕配好后你没滤好,很不好滤的。

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  • rdpenen

    第7楼2007/09/28

    建议先看看产生白色浑浊是由什么引起的,可以用以下步骤:
    1、调酸后变白色,那么酸性多少的时候可以不变白色?
    2、如果只用一种缓冲盐,调酸后是否边浑浊?
    3、降低其中的一种盐的比例,看是否可以在某个点平衡?
    再问一下,你的流动相配置是否正规?检测SOP是否可行?方法是不是法定方法?如果不是法定方法,那么来源是否可靠?

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  • yuxihe

    第8楼2007/09/28

    先不要接柱子,如压力大,说明管路堵塞,一般是柱前过滤器,清洗或更换.如压力正常说明是色谱柱堵塞,用10%甲醇流量从0.2-1.0缓慢增大(视压力大小),柱温升到50度就能解决.
    水相(包含磷酸二氢钾和十二烷基硫酸钠)先单独配制,调整好PH,过滤(0.2um)备用.有机相也单独配制过滤.用前两者按比例混匀脱气.
    必需现配现用.

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  • Mix_Grey

    第9楼2007/09/28

    流动相组成没有问题,应该是你的试剂不对,有假货.改换一批试剂在配一次吧.至于压力大的问题,先用水,在用异丙醇,在切换到水在去掉柱子的情况下冲洗机器各15min,如果机器压力正常的话反接柱子用同样的方法冲洗(其中异丙醇改为甲醇),先用低的流速在开大.如果机器堵的话要先更换堵的部件,通常是泵前过滤器或管线.这样的话,问题应该可以解决.

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  • liyun-300

    第10楼2007/09/29

    我的柱子没有柱温箱,不能加热,按照大家的建议我用80度的热水冲了一下,但是效果不明显.我检查了管路是通的,预柱和混合器里以及滤头都是通的,并且压力都不超过1 MPA,谢谢大家!

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