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HPLC新手,老板砸了个液相摸条件给我,懂得不太多,想向论坛各位大佬寻求帮助C18 35度 流动相 乙腈:水 梯度洗脱 25:75 30:70 40:60前几分钟杂质峰特别高 基线也不稳定 以至于目标峰看起来又扁又平 特别难看 。想请教一下是什么原因??想要得目标峰是白头翁皂苷,是否是因为样品前处理的问题?样品极性物质太多?白头翁皂苷在药物中不好纯化分离?有考虑是否是柱子和流动相的问题,进了一针空白 溶剂峰并没有那么大。这种情况能改善吗?如图感谢各位大佬帮助![img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/11/201911021539176907_1178_4033573_3.jpeg[/img]
同一瓶样品,重复称样、定容、手动进样8次。C18柱流动相:按药典缓冲盐:乙腈(80:20),主峰前有3个杂质峰,主峰后有一个,只是第一个杂质峰面积不稳定,上下波动。第一个杂质峰第一针峰面积156;第一个杂质峰第一针峰面积52第一个杂质峰第一针峰面积49第一个杂质峰第一针峰面积40第一个杂质峰第一针峰面积57第一个杂质峰第一针峰面积32第一个杂质峰第一针峰面积50第一个杂质峰第一针峰面积49又对另一个批次样品进样2针(重复称样)第一个杂质峰第一针峰面积 159第一个杂质峰第一针峰面积 83老师们分析下,到底是系统问题还是样品中相关杂质不稳定?又该如何调整?跪求答复!进样前基线和空白对照都很好!不同样品间都走空白,空白此杂质的积分面积只有1个单位!可以忽略1
目标物纯度99.1%,用色谱甲醇定容成标准溶液,接这稀释成0.2mg/L,再用高液相色谱检测,出峰时间(7.673min)与标准溶液出峰时间(约7.9min)不同,这是为什么,怎么解释?还有能不能判断出色谱主峰(图上标红的)前杂质峰是什么杂质吗?所有色谱条件均一致。初涉色谱,求指[img=,670,307]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909201719047620_6070_1777483_3.jpg!w670x307.jpg[/img]