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【求助】做液相时,图谱如下,是什么原因?请大家帮帮忙,分析下吧,谢谢。

液相色谱(LC)

  • 我是一个新手。
    在做阿莫西林的时候,换了一个新C18柱(pH1-11),由于第一次操作,又没有人现场指导,自己换的。换后按照工程师的要求用甲醇冲柱子了。当时没有漏液。然后换流动相,上样测。我因为有事情,让别人帮忙做下,等我回来,发现漏液。但压力一直比较稳定。做出来的图谱见图一。第二天不漏液,做出来的图谱是图2,这2个流动相(硫酸二氢钠:甲醇=95:5 pH=4.0 )是一样的,流速也一样,样品是用水溶的。第3天换流动相(硫酸二氢钾:乙腈=97.5:2.5 pH=4.0 ),用流动相溶解的样品。图谱见4/5/6。
    这是什么原因啊。是不是柱子坏了?




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  • 子非鱼

    第1楼2007/10/27

    1.是不是用的15cm或10cm的短柱子?三个峰分不开。
    2.两个流动相中有机相的比例都太小了,盐太多对柱子不好。

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  • qjzy

    第2楼2007/10/28

    你说:"换后按照工程师的要求用甲醇冲柱子了。当时没有漏液。然后换流动相,上样测。"
    在甲醇和流动相之间你没有用纯水:甲醇=95:5过度一下吗?
    我没有做过阿莫西林,但从峰形上看,这几个峰都不太好看,象柱子有问题.
    你的流动相都是无机盐很多,有机相少,在甲醇和流动相之间若没过度,可能会析出结晶.

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  • advenone

    第3楼2007/10/28

    1:从第一与第二张图的保留时间和峰高来看,漏液并不严重,没大的影响.
    2:很可能是柱子的问题,建仪换根柱子试试.

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  • sunny_ad

    第4楼2007/10/28

    还有很多东西需要我学习,感谢!

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  • jennife

    第5楼2007/10/28

    换根柱子就可以了。

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  • 浪花一朵

    第6楼2007/10/28

    我没接触过这一类的样品,但我感觉是流动相的比例不合适,后者的流动相要比前者好一些,但峰没分开,还须再调一下可能会好一些吧.

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  • yjxia

    第8楼2007/10/28

    应该不是柱子的质量问题,可能是你选的C18柱不太适合,或者是分离条件不好,组分没有分开。你的流动相水相含量较高,应该选用耐水的C18柱,这样走高极性化合物会有较好的分离效果。

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  • pyy8092

    第9楼2007/10/28

    你的流动相都是无机盐很多,有机相少,在甲醇和流动相之间若没过度,可能会析出结晶.

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  • yjxia

    第10楼2007/10/28

    如果柱压一直比较正常的话,不一定是盐析出结晶的

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