【讨论】美国药典有关物质气相填充柱检测问题

liming468

2007/12/09

私聊

气相色谱（GC）

各位兄弟：
在做一个USP原料药品种气相色谱检测：用的是自身稀释对照方法如下：
【有关物质】：
测试贮备液A：取本品约 3g置分液漏斗中加水100ml。10分钟后，加0.5N氢氧化钠溶液50ml混匀，用乙醚50ml提取两次，合并提取液。用水20ml洗脱，弃去水层，乙醚层用无水硫酸钠脱水。乙醚层置氮气下蒸发至干，室温下减压干燥2小时。精密称取残渣1.5g，置10ml量瓶中，加乙酸酐-吡啶混合液（5: 95）5.0ml，60℃加热10～15分钟。放冷，用上述混合液稀释至刻度，摇匀。
测试贮备液B：用上述乙酸酐-吡啶混合液稀释测试贮备液A，1:200
色谱系统(色谱法<621>)：气相色谱仪备有火焰-离子化检测器；4-mm × 1-m玻璃管柱：涂布浓度为5%的G17(75%苯基-25%甲基聚硅氧烷)固定液，100～120目的S1AB(硅藻土：酸洗和碱洗)载体，300℃活化24小时。柱温与进样口温度约260℃，检测器温度约300℃。载气为干燥的氦气，流速60ml/min。测试贮备液B重复进样5次的色谱中，相对标准偏差不得过3.0%。
测定法：精密量取同体积(约2µL)的测试贮备液A与测试贮备液B，注入色谱仪，记录相对于主峰的相对保留时间0.1～5.0色谱图，测量测试贮备液A中除溶剂峰与他莫昔芬峰以外的峰面积，并计算这些峰的峰面积和。单个峰面积不得大于测试贮备液B色谱图中他莫昔芬峰面积(0.5%)，总峰面积不得大于测试贮备液B色谱图中他莫昔芬峰面积的2倍(1.0%)。

我们的柱子型号是：6-mm × 1-m玻璃管柱：涂布浓度为5%的G17(75%苯基-25%甲基聚硅氧烷)固定液，100～120目的S1AB(硅藻土：酸洗和碱洗)载体，我现在的流速改为了 40ml/min,将柱温改为240℃，因为原来的色谱条件，出峰为2分钟左右。可是问题是填充柱的柱效是150左右，太低了。低浓度供试品是4分钟左右出峰，高浓度在6.395分钟左右出峰，可是低浓度在4.6分钟左右出峰。明显高浓度色谱条件需要优化，可是小弟没有做过填充柱，改怎么优化呢。谢谢大家。