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【求助】造成色谱峰分叉的原因有那些

  • 枪手怪蜀黍
    2008/02/18
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 如题,最近我的HPLC出现峰分岔,但总是找不到问题的根源,求助!
    我这台液相是致敏染料(ADD)和甲醛用同一根柱子做的,若先做完ADD再做甲醛就会出现峰分叉,但是仅仅是衍生剂的峰分叉其他峰不分叉,即甲醛峰不分叉,但是若按此时做校准曲线去测量样品,曲线斜率变大所得的结果会偏大20%左右。
    找到问题根源了,跟ADD没有关系,是自己没有经验,我的样品中的剩余的衍生剂浓度过大导致峰形过饱和.
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  • xydell

    第2楼2008/02/18

    预柱的问题吗?这个原因好象满多的

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  • caoyin9512

    第3楼2008/02/18

    看是不是每一个峰都在同一位置出现分叉。如果答案是肯定的,说明与柱子的关系比较大。

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  • nnsss

    第4楼2008/02/18

    换过不同品牌的柱子吗

    septyaya 发表:如题,最近我的HPLC出现峰分岔,但总是找不到问题的根源,求助!

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  • 枪手怪蜀黍

    第6楼2008/02/18

    洗了多次柱子还这样,样品峰不分岔,溶剂峰会分岔,导致结果偏大。

    septyaya 发表:如题,最近我的HPLC出现峰分岔,但总是找不到问题的根源,求助!

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  • nnsss

    第7楼2008/02/18

    结果偏高和此关系不大

    septyaya 发表:洗了多次柱子还这样,样品峰不分岔,溶剂峰会分岔,导致结果偏大。

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  • zzghy

    第8楼2008/02/18

    也有可能是流动相配制的问题,或者时间久了.
    还有是否用流动相当溶剂去溶解样品,单用有机溶剂溶样也有出现分岔峰.
    建议重配一次或配制不同比例的流动相试一试.

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  • 枪手怪蜀黍

    第9楼2008/02/18

    之前也出现过这个问题,柱子也没换过,有时梯度用流动相(乙睛:水:60:40)从0、0.1、0.3、0.5、0.7、1各隔5分钟梯度上升走过一遍,会解决问题。

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  • faanm00

    第10楼2008/02/18

    首先柱子的问题,分离效果差了,柱填料老化塌陷都有可能造成这个问题
    解决也很简单,找一点标准品萘溶液,走一针比对你柱子的说明书看峰位峰形,如果是和说明书上的图差很多就该换柱子了

    其次是你的样品进样量太大太浓了,稀释稀释就行了

    还有就是标品不纯或样品分离效果不好里边裹峰,或者流动项被污染

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