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【求助】请教液相出峰问题(岛津LC-20AB)

液相色谱(LC)

  • 现在在做柠檬酸测定,用的磷酸二氢钾做流动相,做了一天了,结果很不好,峰型很难看,前半个峰托的很久,后半个峰下降很快,还出现负值,不知道哪里的问题?流动相PH为2.5,请各位大侠指教阿 急!!!!
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  • mifeng7530

    第1楼2008/04/06

    楼主能不能详细说明一下流动相条件,柱温,柱子型号,流动相流速,进样量,用什么检测器,最好能将图传上来请大家给你出出主意.

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  • lhy_08

    第2楼2008/04/06

    用的GraceSmart RP 18 5u的柱子,用的紫外检测214nm,进样量都有改动过,10微升倒20微升,标准样用水、流动相和0.01mol/L氢氧化钠都稀释过,峰型还是没怎么变化,没法积分,流动相现在用的0.02mol/l的磷酸二氢钾昨天用的ph2.9,今天换成2.5,还是不行,非常着急,肯定大侠们指点一下啊~~~~~~~~

    lhy_08 发表:现在在做柠檬酸测定,用的磷酸二氢钾做流动相,做了一天了,结果很不好,峰型很难看,前半个峰托的很久,后半个峰下降很快,还出现负值,不知道哪里的问题?流动相磷酸二氢钾PH2.5,请各位大侠指教阿 急!!!!

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  • lhy_08

    第3楼2008/04/06

    lhy_08 发表:现在在做柠檬酸测定,用的磷酸二氢钾做流动相,做了一天了,结果很不好,峰型很难看,前半个峰托的很久,后半个峰下降很快,还出现负值,不知道哪里的问题?流动相PH为2.5,请各位大侠指教阿 急!!!!

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  • lihongbo08

    第4楼2008/04/06

    会不会是进样量大于柱容量造成的,减少进样量在试一下

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  • lhy_08

    第5楼2008/04/06

    进样量10微升 不算多吧 请教大侠 稀释标准品时用什么好呢 我流动相拥磷酸二氢钾 是不是用流动相来稀释样品和标准品比较好呢?国家标准很多都不可行,现在也不知道怎么办好 其实按国家标准上用氢氧化钠稀释我也试过了,用流动相也试过了 另外用水也试过了 结果还是峰不好 不知道到底哪里的问题,柱温没设定 24度左右 流动相流速0.5ml/min时,要半个小时才能出峰 峰型没有改变 流速0.8时 出峰快些 但峰型依然很差 不知道该怎么办好了?????板上有没有作过柠檬酸或者有机酸测定的??能不能指点一下阿????万分感谢!!!!

    lihongbo0804 发表:会不会是进样量大于柱容量造成的,减少进样量在试一下

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  • huilee

    第6楼2008/04/07

    过载不单纯要考虑,进样量,还要看你的样品本身的浓度,你稍微把有机相的比例调大看看,应该有比较满意的效果

    lhy_08 发表:进样量10微升 不算多吧 请教大侠 稀释标准品时用什么好呢 我流动相拥磷酸二氢钾 是不是用流动相来稀释样品和标准品比较好呢?国家标准很多都不可行,现在也不知道怎么办好 其实按国家标准上用氢氧化钠稀释我也试过了,用流动相也试过了 另外用水也试过了 结果还是峰不好 不知道到底哪里的问题,柱温没设定 24度左右 流动相流速0.5ml/min时,要半个小时才能出峰 峰型没有改变 流速0.8时 出峰快些 但峰型依然很差 不知道该怎么办好了?????板上有没有作过柠檬酸或者有机酸测定的??能不能指点一下阿????万分感谢!!!!

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  • lhy_08

    第7楼2008/04/07

    多谢指教
    我流动相拥的缓冲溶液,调大流动相比例的话 泵的压力太大,这样会不会不好

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  • 深海游鱼

    第8楼2008/04/08

    把样品浓度配制低一些,大约在500ppm左右时试试,如果浓度过大,肯定会影响峰形。

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  • dreams444

    第9楼2008/04/08

    你把柱子倒着用了吧。你的柱效不高。可以增加柱温。加有机相,用水相:甲醇(或乙腈)(75:25)看看。

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  • lhy_08

    第10楼2008/04/09

    柱子本身标出了流向,如果倒过来用,可以吗
    另外 我做的是有机酸,请问用水和甲醇做流动相合适吗
    刚开始做液相,很多地方不懂,多谢阿

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