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【求助】请问隐色孔雀石绿和隐色结晶紫的检测如何达到基线分离?

  • tingting001
    2008/05/05
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 如题。我用的是ACQUITY UPLC BEH C18柱,采用乙腈和10mM乙酸铵作为流动相,尝试了很多不同的梯度洗脱条件,始终不能达到隐色孔雀石绿和隐色结晶紫的基线分离,即分离度低,只有1.0左右。而可接受的分离度必须达到1.5,我也尝试了很多不同的流动相,结果还是没有改观,不知道问题出在哪里。我是初学者,很多东西都不懂,麻烦大家了。
    请各位专家前辈帮忙,谢谢大家了。^_^^_^
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  • nnsss

    第1楼2008/05/05

    降低乙腈比例,降低柱温.降低流速,如还不行,换柱子

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  • tingting001

    第2楼2008/05/05

    降低乙腈比例的话会出现平头峰,不够尖锐。

    如果要换柱子的话,换什么柱子合适呢?我们还有ACQUITY UPLC BEH Shield RP18 色谱柱,合适吗?这个柱子跟BEH柱有很大区别吗?

    还有一个问题是,跑孔雀石绿和结晶紫时两者很难完全洗出,怕换一根新柱的话效果不好就浪费了一根新柱了。

    再次谢谢。^_^

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  • nnsss

    第3楼2008/05/07

    3微米的柱子,峰行不好降低溶样强度

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  • tingting001

    第4楼2008/05/08

    3微米的柱子?什么厂家的?如果条件所限,柱子不能换,还有其他方法解决么?
    降低溶样强度?我是用100%乙腈溶解标品的,难道要用乙腈水溶解?或者流动相溶解?我是新手,请赐教。能否详谈?我的e-mail:wentingluo@163.com

    nnsss 发表:3微米的柱子,峰行不好降低溶样强度

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  • liang-liang

    第5楼2009/10/25

    不行,要用盐酸羟胺做定溶液,不然孔雀石绿会被氧化

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  • 色色猪

    第6楼2009/10/27

    我们原来用的是氰基柱250mm的,不过C18的也可以也要用250的,这么难分离的东西不建议用UPLC柱子,条件太难摸了

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