【求助】有人用液相测过草酸吗

草酸测定的方法很多，如比色法、色谱法、酶法、间接法等，但均因操作复杂、费时或需特殊设备。

我以前看过一篇文章：高锰酸钾褪色法测定尿液草酸

如果你需要，我可以贴出来给你参考一下

色谱柱：C18 ODS-3 250*4.6mm
流动相：0.1mol/L磷酸二氢铵+磷酸(PH=2.5)
流速：1.0
柱温：40
检测：UV210
可同时分析草酸、酒石酸、乙醇酸、丙二酸、乳酸、醋酸、富马酸、琥珀酸、丙烯酸。

草酸：HOOCCOOH，从结构上就可以看出，离子化合物，在流动相中容易电离成阴离子，造成在反相色谱中没有什么保留，没有保留就没有办法提分离度了，定量的时候积分就不准确，所以要在反相中增强保留就必须调节流动相pH值，使草酸在流动相中以分子形式存在，但是草酸分子很小，和C18柱的键合相之间几乎没有什么作用，所以还是没有什么保留，所以活到九十 学到一百给你提供的流动相"0.1mol/L磷酸二氢铵+磷酸(PH=2.5)"就是纯水相（没有加有机相），PH也低（为了使草酸在流动相中不电离），但是一般的C18柱是不适合用这种流动相和这么低的pH值的。最好用纯水柱或者峰尾很好的C18.如果是这样的话，有没有合适的柱子，没有的话是否会买。而且从这个流动相的组成来看，洗脱能力比较差，你的样品和草酸是否能有好的分离度，是否会有物质洗脱不下来，残留在柱子上，对下一个样品分析造成影响。



草酸应该在有机溶剂中溶解性也不好，正相色谱估计也行不通,液相色谱方法的建立思路一般就是这样：反相不合适考虑正相，正相不合适就要考虑离子对了。现在要考虑离子对了，在流动相中加离子对试剂，如果真是这样，草酸在流动相中电离成阴离子，可以用阳离子对试剂,如四丁基氢氧化铵，用过离子对的柱子最好专用。

草酸的挥发能力估计气相也不行。

好像说到这里显得色谱测定草酸不是很乐观，其实不是，我很乐观，我相信液相肯定是能测的。我要表达的意思就是：一套稳定可靠的方法建立起来还是比较麻烦的（如果定量还要有标准品）。如果是为了发文章，不在意这些也就无所谓了。看你的目的了，再就是重新思考一下滴定法测定不准确，虽然不是很准确是否结果就真的不可以接受的。

虽然现在HPLC很流行，不过我想有些东西不是一定用它测就好，还要看试验目的具体分析。

罗嗦了这么多，也是本着讨论的目的，仅供参考。

你的样品是什么？不同样品中的草酸测定方法不一样的！

还是有很多C18柱可以承受PH2.5的,如Zorbax SB, 应该可以用调节pH的反相液相来测定草酸的.

3楼的回答讲的不错，比1楼的HPLC专家讲的好，不要被本版专家误导。如有2楼的柱子，可以试试，基本没多大的问题。
可到本人博客看看，有一个对其分析的总结，等着放上来。

流动相4mmol/L硫酸做流动相，流速0.6ml/min，有机酸柱子，RI检测器

我曾经用过二楼的方法，好像出峰时间特别早，与有机酸类的乙酸等很难分离。不知到是我柱子还是检测器的问题。

谢谢各位的帮助，我的样品是一种有机酸的降解产物，成分比较复杂，酸性较强，曾经用氨基柱测定其成分，结果柱子用不到1个月就报废了。我只知道成分中肯定有草酸，但与主成分能否分离就不知道了。不过，有了各位的建议，我一定会去试试。