【转帖】桂附地黄丸TLC鉴别方法的研究与改进

2 方法及结果
2．1 丹皮酚的鉴别2．1 1 供试液1的制备(药典方法) 分别取A、B、C样品各9g，剪碎。加乙醚15mL，振摇15rain，放置1h，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加丙酮lmL使溶解制成A1、B1、C13种供试液备用。
2．1．2 供试液2的制备(改进方法) 分别取A、B、C样品各9g，剪碎。加硅藻土4g，研匀，加乙醚2OmL，超声处理20min，滤过，滤液低温挥去乙醚，残渣加丙酮lmL使溶解，制成A2、B2、C2 3种供试液备用。
2．1 3 对照液的制备 取丹皮酚对照品加丙酮制成每1mL含lmg的溶液备用。2 1．4 点样展开显色 按《中国药典》2000年版一部TLC法(附录VIB)试验，吸取上述供试液和对照液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上使成条状，以环己烷-醋酸乙酯(3：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰。
2 .1. 5 实验结果 TLC图谱中，A2、B2、C2 3种供试品和对照品存相同位置上显相同的蓝褐色条斑，且清晰、持久，放置不消失；Al、B1、C1 3种供试品只能隐约可见条斑，且放置后斑点很快消失。
2. 2 桂皮醛的鉴别
2 .2 .l 供试液3的制备(药典方法) 分别取A、B、C样品各9g，剪碎。加乙醇10mL，振摇15min，放置1h，滤过，制成A3 、B3、C3 3种供试液备用。
2 .2．2 供试液4的制备(改进方法) 分别取A、B、C样品各9 ，剪碎。加醋酸乙酯20mL，超声处理15min，冷却，滤过，滤液低温挥干，残渣加乙醇5mL使溶解，制成A4、B4、C4 3种供试液备用。
2．2. 3 对照液的制备 取桂皮醛对照品，加乙醇制成每1毫升含1μL的溶液，作为对照液备用。
2 .2 .4 点样展开显色 按《中国药典》2000版一部TLC法(附录VIB)试验，吸取供试液 A3 、B3、C3，A4、B4、C4各15μl、对照液2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，再分别取上述供试液各15μL、对照液2μL点于另一硅胶G薄层板上，均以石油醚(30～60℃)-醋酸乙酯(17：3)为展开剂，展开，取出，晾干。第1块薄层板上喷以0.1％二硝基苯肼溶液(药典规定的显色剂)。第2块薄层板上喷以二硝基苯肼乙醇试液(筛选出的显色剂)。
2. 2．5 实验结果 第l块薄层板整个变为黄色，所有供试品和对照品均无斑点显出，无TLC图谱。第2块薄层板TLC图谱中，A4、B4、C4 3种供试品和对照品在相同位置上显相同的橙黄色斑点，且清晰、持久，放置不消失；A3，B3，C3 3种供试品只能隐约可见斑点，且放置很快消失。

3 结论与讨论
3．1 桂附地黄丸中丹皮酚的TLC鉴别 本改进方法在提取液制备时，通过加硅藻土吸收了部分蜂蜜，排除了提取时蜂蜜的干扰，通过超声波处理促进了丹皮酚在乙醚中溶解，使丹皮酚完全被提出，因此图谱中斑点清晰、持久。而采用药典方法提取时，图谱中斑点模糊不清、且很快消失。
3．2 桂附地黄丸中的桂皮醛TLC鉴别
桂皮醛存在于肉桂的挥发油中，桂附地黄丸中肉桂约占2％，肉桂中含挥发油1～2％，油中含桂皮醛75～90％，可见桂附地黄丸中桂皮醛成分含量极少。本改进方法通过改变提取剂(乙醇改为醋酸乙酯)和增加超声波处理，使桂皮醛完全被提取出，避免了其它杂质干扰，通过改变显色剂，即把0.1％二硝基苯肼溶液(混浊且有黄色沉淀)改为二硝基苯肼乙醇试液(澄清)，使显色剂不掩盖色谱斑点，因此改进方法得出的TLC图谱斑点清晰、持久。而采用药典方法得不出TLC图谱。
3 .3 本项研究改进的桂附地黄丸中丹皮酚和桂皮醛TLC鉴别方法简便、灵敏、可靠、清晰、持久，可用于本品的质量控制。
参考文献[1] 中华人民共和国药典一部2000：546．548来源：东方医药网