【讨论】内标。内标。还是内标

楼主的标曲有经过前处理步骤吗？还是直接用流动相定容的？会不会跟同系物与待测药物的基质干扰影响不同有关。

有的啊，液液萃取的。
今天用稀释的内标标液直接连续进样20针，峰面积从36万最后到了50万了

我觉得应该是液相的问题，不是质谱的问题。因为我做精密度的时候内表的面积变化不大，如果是质谱的问题，面积肯定会不稳定的吧？？？
我现在的洗针液强袭500ul，弱洗1500ul，够大的了吧。

我的机器是waters PREMIER XE+UPLC,
MP是70：30的乙睛甲酸水。
样本保留时间0.93，内标保留时间1.63

内标峰面积的变化有很多原因啊，那你的样品峰面积变化趋势怎样呢，是否和你的样品相同呢？这种情况就要多进质控样品啊，如果质控样品比值差不多，那就也没什么关系啊。我就遇到过内标峰面积越进越大，然后再下降，但是比值差不多，分析原因可能是温度的影响，气温在中午下午比较高，液氮气化效果好。
还有可能就是你的流动相没有平衡好啊，比如加氢峰，流动相中间加酸，系统没有平衡好，一开始面积不大，越来越高，但是还是会稳定下来的，这样可能需要比较长的时间，最好呢就是连着进样，等信号稳定下来以后，再大批量一次样。

我觉得楼主的问题根源应该在于你进样之前，整个离子源还没被你的流动相很好地清洗干净，因而随着冲洗时间的加长，整个管路越来越干净，这样内标的响应值越来越好，因而面积越来越大。

楼主考察过仪器的碰撞气压力对内标的影响吗？

我觉得LZ可以进样其他化合物，排除是LC，或者MS的仪器故障问题，然后研究内标面积变化的原因，如果连续进样有变化，我觉得一是如果有选择ESI前端分流，注意分流是否均匀恒压，二是化合物残留是不是严重，通过进样后进溶剂就知道，三是内标寻找到的子离子是否合适，是否是比较稳定的碎片，供参考。

大家讲的都有一定道理啊。现在看来，需要正式实验前将系统很好的平衡一段时间啊。