haiyuzp
第7楼2010/06/01
icetrob:
这次我参加盲样考核的经历:
考核的参数是:氯霉素
方法:气相色谱法
样品:南美白对虾
那到考核样后,一看,6个平行,没有空白,于是我用我们自己的留样(因为没有南美白对虾,就选用了鲫鱼)做了添加,因为气相法做氯霉素前处理步骤多,还要衍生化,对环境要求也高,连标曲都要衍生化,于是除了做了GC法之外,我还额外尝试了酶联免疫法。
结果如下:
酶联免疫法结果:2个6ng/ml,1个8ng/ml 回收50%
GC法:3个6ng/ml 回收60%
如果按回收反推的话:盲样的值应该在:10-15ng/ml
后来还是按实际结果报上去了,结果添加值是7.5ng/ml
这个例子还是不明白,如果回收率是这样,还做回收率有什么用呢?为什么现象与事实不符呢?
小马王
第8楼2010/10/06
今天偶然翻出此帖,又想起前几天看到了的邓勃老师一篇文章《分析测试中偏倚检验与准确度评估》中关于回收率的论述,贴上来与大家分享一下。
6、用加标回收率评定
这是分析人员如今普遍采用的一种检查系统误差因素产生偏倚的方法。 加标回收不能发现固定系统误差因素产生的固定偏倚,只能发现比例系统误差因素产生的相对偏倚。如果测定误差随被测定物质的量而改变,通过计算加标回收率来评估准确度是可行的。用加标回收率评定准确度的基本条件,要求校正曲线的斜率随标准加入量而改变。原样中测定值为Ax,如果存在的是固定偏倚,就等效于在样品中加入了一个固定量,加标前后都增加了相同的一个量,加标前后两次测定值相减,固定偏倚被低偿,发现不了固定偏倚。因此,从测定值中减去固定偏倚值就是加入的量值,回收率是100%。如果存在相对偏倚,随着加入量斜率发生变化,这时回收率将不是100%。
用氢化物发生-原子荧光法测定玉容霜中的微量砷,测定值为0.65μg/g,加入砷标量4.50μg/g之后,测得值为5.15μg/g,回收率是100%。如果存在的是固定系统误差,样品中铅、硒、钙、镁、铁等产生的干扰效应相当于0.10μg/g砷(等效砷),它已包含在测定值0.65μg/g中,也就是说原来测定值真值很可能是0.55μg/g,测定的结果偏高0.10μg/g砷。当再加入砷标量4.50μg/g后,铅、硒、钙、镁、铁等干扰元素含量并未变化,不再干扰对加入砷量的测定,回收砷量自然是4.50μg/g,回收率为100%。因此,回收率100%并不一定意味着测定中不存在固定系统误差因素产生的偏倚。由此看见,用加标回收率%来评定测定的准确度,只适用于比例系统误差产生相对偏倚的场合,而不能发现测定中的固定偏倚。加标回收率100%,只能说明所加标的这一量值水平不存在固定偏倚,而不能证明加标前的测定结果不存在系统误差产生的偏倚。测定加标回收率的目的是评定加标前的测定量值的准确度,而不是评定加标后实际测定量值的准确度。 为什么能这样做, 有一个隐含的基本假定条件, 即认为加标前、后量值水平的回收率是一样的,局外因素对测定的影响不随加入量而改变。这一假定条件要求加入量与原含量不能相差很大,必须是很接近的。因为相同的因素对量值相差很大的两个不同水平含量产生的影响是不同的。
对于然而,标准加入法的情况正好与加标回收法相反,要求校正曲线的斜率不能随加入量而变化。
如果斜率随加入量而改变,对于同一个截距,外延到横(量值)坐标的交点,将随斜率而改变,斜率增大,交点到坐标原点的距离缩小,斜率减小,交点到坐标原点的距离增大。因此,求得的测定量值将随斜率,也即随加入量而改变。
测定中是否存在固定或对相对偏倚决定了能否使用标准加入法进行定量和加标回收率来评定准确度。标准加入法要求斜率是不随加入量而改变;而加标回收则要求斜率随加入量而改变。即标准加入法适用于存在固定偏倚,加标回收适用于存在相对偏倚的场合。
在实际工作中如何来分辨固定偏倚或对相对偏倚?用纯溶液和样品溶液同时制作校正曲线, 如果两条线是平行的,只存在固定偏倚,可用标准加入法定量,不能用于加标回收;如果两条线是交叉的可用于加标回收,不能用于标准加入法定量。