【讨论】如何针对一个未知物质建立合理的液相分析条件?

其实大部分还是要靠经验的。做不同的样品碰到的问题往往不一样，还是要靠经验去解决。

我觉得对于药品，可以参考中国药典的方法。中国药典上会给出结构式，把化学结构类似的药品的前处理方法和色谱条件归归类，看多了就有经验了。

根据化合物性质，结构结点，选择相应的色谱柱，确定检测用检测器，气相或液相。在选定这些后，选用一个初始流动相，试试，然后调整。

其实，我总觉得在分析未知物时，首先要知道这个化合物的化学结构、pKa值、极性、溶解性、稳定性（避光或低温保存）等化学物理常数，然后选择合适的样品处理方法，使样品有较好的萃提回收率和较少的干扰成分存在；而对于分离分析这块，如果使用紫外检测器，在这之前应先做个化合物的吸收波长扫描，以找出其最大吸收波长，因为ODS柱用得多，固定相方面不需要怎么考虑，流动相先用纯水和乙腈或甲醇在不同比例时进行调节，保证出峰时无干扰和一定的分离度，然后依据峰形和化合物的pKa值进行水相的pH值调节，以找到最佳的流动相体系（保证了最大响应、最少干扰、最好的分离）
一点初见，敬请指教！

就我自己所观察,绝大多数实验室中，HPLC方法的建立仍在靠经验进行:
首先进行反相色谱实验，调整流动相中有机相的比例，以求得足够的分离度、合理的操作时间以及易于检测的谱带。
然后改用不同的色谱柱，改变温度和流动相pH值，优化筛选溶剂的配比组成，以其它溶剂代替原来有机溶剂。

我想目前大多数实验室都和vicou_chen的做法差不多吧?

目前最大的问题就是如何选择这个最初的液相条件,使它一上液相就能得到一个比较好的分离效果,为以后的条件筛选奠定基础.

这个一两句话说不清楚啊，http://www.instrument.com.cn/show/download/shtml/054119.shtml
这是资料中心的一本书，很好，方法建立思路都有，可以好好看看。
这本书网上好多地方能下载，不过一般都只有722页。

这就是经验了。