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【求助】高效液相色谱流量的问题

液相色谱(LC)

  • 色谱柱规格; 4.6*160mm C18 5um
    流动相:甲醇-水(85:15)
    样品:硝基苯的甲醇溶液(50ul/ml)
    进样量:20ul
    我想做峰高随不同流量的变化,流量梯度为:0.3, 0.5, 0.7, 0.9, 1.1, 1.3, 1.5ml/min。
    但是,发现当流量为0.3和0.5ml/min时色谱峰比其他几个流量的峰要高,峰宽也宽,这两个流量的色谱峰的峰高相同,峰宽0.3ml/min的要宽。剩下的0.7-1.5ml/min的峰高相同,峰宽依次变窄。
    我是觉得,进样量相同的情况下,峰面积应该相通啊,也就是0.3-1.5ml/min应该是色谱峰由矮胖变为高窄的吧,但我做出来却不是。
    请教各位这是怎么回事啊,不胜感激!
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  • It is me!

    第1楼2008/09/28

    这种情况估计可能不是简单的正比例关系。

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  • nnsss

    第2楼2008/09/28

    你 的浓度恐怕早超线性了

    flemming 发表:色谱柱规格; 4.6*160mm C18 5um
    流动相:甲醇-水(85:15)
    样品:硝基苯的甲醇溶液(50ul/ml)
    进样量:20ul
    我想做峰高随不同流量的变化,流量梯度为:0.3, 0.5, 0.7, 0.9, 1.1, 1.3, 1.5ml/min。
    但是,发现当流量为0.3和0.5ml/min时色谱峰比其他几个流量的峰要高,峰宽也宽,这两个流量的色谱峰的峰高相同,峰宽0.3ml/min的要宽。剩下的0.7-1.5ml/min的峰高相同,峰宽依次变窄。
    我是觉得,进样量相同的情况下,峰面积应该相通啊,也就是0.3-1.5ml/min应该是色谱峰由矮胖变为高窄的吧,但我做出来却不是。
    请教各位这是怎么回事啊,不胜感激!

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  • flemming

    第3楼2008/09/28

    我也觉得是这样,是不是一般高液都不做流量优选的,我是个新手,不止是否需要做这个。

    hmzhou83 发表:这种情况估计可能不是简单的正比例关系。

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  • nnsss

    第4楼2008/09/30

    对于4.6*250MM的柱子,1.0ML/MIN就是最佳的流速,

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