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【资料】国产大肠菌群快速测试片操作手册
mij282
2008/10/14
私聊
食品常规理化分析
大肠菌群操作方法大肠菌群快速测试片操作手册
一、 测试:
1、 未开封时,冷藏于≤8℃(≤46℉),并在保存期内用完,高温度时,凝固水可以排除,包装物最好于室温启开。
2、 已开封的,将封口以胶带封紧。并按说明书上进行存储。
3、 制备1:10和更大稀释的食物样品稀释液,称取或吸取食物样品,置入适宜的无菌容器内,如均质袋、稀释瓶、WhirlPak bag或者其他灭菌容器内。
4、 加入适量的无菌稀释液,包括Buffered peptone Buffer(IDF phopsphate buffer ,用0.0425g/L的KH2PO4调PH7.2) 、0.1%的蛋白胶水(ISO方法6887) 、缓冲蛋白胶水(ISO方法6579) 、盐溶液(0.85-0.90%)、bisulfite-free letheen broth或蒸馏水.
不可使用含有枸橼酸盐、酸性亚硫酸盐或硫代硫酸盐的缓冲液. 因为它们能抑止菌生长。
5、 搅拌或均质样品。
样品的稀释液调PH6.5-7.2(对酸性样品的稀释液用1 NaOH,对碱性样品用1mol/L的HCL调PH。
6、 将测试片置于平坦表面处,揭开上层膜。使用吸管将1mL样液垂直滴加在测试片的中央处。
7、 细心将上层膜缓慢盖下,避免有气光泡产生,切勿使上层膜直接落下。
8、 使用压板隆起面底朝下,放置在上层膜中央处。轻轻的压下,使样液均匀覆盖于圆形的培养面积上,切勿扭转压板。
9、 拿起压板,静置至少1分钟以使培养基凝固。
10、 测试片的透明面朝上,可堆叠至20片,对有一定湿度培养箱能保持最少份损失是需要的,并且可以节省空间。
11、 可目视及用标准菌落计数器或其它的照明放大镜计数,并可参考判读卡计算菌落数。
12、 可以分离菌落作进一步鉴定,即掀起上层膜,由培养胶上挑取单个菌落。
注:培养时间和温度因方法而有不同,最通用的认可方法是:
总大肠菌群
● AOAC官方方法986.33和989.10(乳/生乳和其它乳制品)
大肠菌群:32℃±1℃培养24±2h
●中国食品卫生微生物学检测标准(2003版)
大肠菌群:36℃±1℃培养24±2h
● AOAC官方方法991.14(食品类)
大肠菌群:35℃±1℃培养24±2h
● NMKL方法(147.1993)
大肠菌群:37℃±1℃培养24±2h
● AFNOR认可方法3M 01/2-09/89A和B(除水生贝壳类动物外的所有食品)
大肠菌群:30℃±1℃培养24±2h
耐热的(粪)大肠菌群
● AFNOR认可方法,3M 01/2-09/89C(所有食品) 44℃±1℃培养24±2h。当提高培养温度时,培养箱应有一定的湿度是需要的。
二, 测试大肠菌群的判读方法(附件续)
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版主-mifeng7530
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