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【第一届网络原创作品】微量比色皿的正确使用方法

紫外可见分光光度计（UV）

  • （一）为何要使用微量比色皿
    （1）测试样量稀少：出于种种原因，当被检测的样品量一般少于1mL时，如果仍然按照传统的检测方法（即将样品放入到标准比色皿中检测时），由于入射光束不能照射到或不能完全照射到样品上，所以不能得到正确的检测结果。其原因是：我们经常使用的标准比色皿，规格为10×10mm，容积为4mL；而入射光束的光斑一般均照射在比色皿的中部（见图－1），换句话说、如果样品少于1.5mL时，从单色器发出的光束光斑是照射不到样品上去的，何况区区的几百微升的样品呢？因此当样品量少时只能采用微量比色皿。


    图－1光斑与样品的关系

    （2）测试样价格昂贵：有的标准试剂或标样的价格很贵，如果配制的测试样品量过大会造成不必要的经济损失；例如当前比较热门的DNA测试，其标准样品每克的价钱大约1万元人民币。所以使用微量比色皿是势在必行之举。

    （二）微量比色皿的种类
    （1）短光程微量比色皿：此种比色皿的特点是比色池前后壁之间的距离很窄，所以注入的液体量相应变小了，改变两壁间的距离就可相应改变样品体积，已达到节省样品或试剂的效果；此种比色皿的容积一般在100微升左右（外观见图－2）；此种比色皿目前市面上比较少见了，它的外形设计据说是参照东欧国家的样例。此种比色皿的优点是：由于池面受光面积很大，无需进行光斑与池子间的拟合调整，安放到比色池架时很随意，不用顾忌每次插拔比色池的位置的同一性；缺陷是清洗内壁较为困难。


    图－2、短光程微量池

    （2）通用型微量池：这种微量比色皿的外形尺寸与普通标准池无二异，并且光程L仍保持10mm不变，只是在池子与光轴平行的两侧内壁上粘贴了两块内衬石英（或光学）玻璃已达到减少池子容积的目的；这样、改变两块玻璃的厚度便可改变池子的容积，此种池子的装入样品量大约在0.35～1mL间；其示意图如图－3


    图－3
    值得一提的是，通用型微量池分为两种类型，主要区别在贴在池子两壁上的内衬玻璃的材料；一种是普通石英（或光学玻璃），其价格较为便宜；另一种是黑石英材料，价格较为昂贵；使用黑石英材料做内衬的池子的优点是：杂散光较少。
    这种通用型微量池的外形见图－4所示；


    图－4、通用微量池

    使用此种微量池的关键点是：使用前一定要检查入射光斑是否正确地照射到光槽上，如果光斑打偏在内衬玻璃上的话，将会产生很大的噪声；此外由于仪器在制造时，很难保证光轴与比色池架的垂直中心完全吻合，因此光斑难免会偏离微量池的光槽；为了保证光斑完全照射到光槽中，有的仪器在使用通用微量池时往往在池子的前面加装一片遮光板，该遮光板的中央开一条缝隙，该缝隙与微量池的光槽的宽度一致，这样就保证了光斑完全照射到光槽中了，遮光板外形见图－5；


    图－5、 遮光板

    这种通用型微量池的优点是：普及性很强，基本可以配置在任何分光光度计上；同时、国产池子的价格也不算贵，普遍受到使用者的欢迎。但是该池子与短距离微量池一样有个相同的缺点，那就是清洗时比较麻烦，使用一般的冲洗措施不易彻底洗净池内壁的残留物，必须采用超声波清洗器。

    （3）专用超微量比色皿：此种比色皿的容积均很小，一般进样量小于50微升，非常适合生物样品及微量萃取样品；这种池子的盛液槽很小且呈水平状，改变容积的方法也是改变池子的光程L，即前后壁的距离，外形见图－6，



    图－6、超微量池组

    此种比色皿的优点除了进样量少之外，还有进样便捷和进样量易于控制（使用普通加样枪即可）、清洗方便等特点；唯一美中不足的是，由于使用该类型比色皿时要配备专用的池架（见图－7）；所以其价格较为昂贵；



    图－7、微量池架

    备注：该池子在使用前，要做微量池、遮光板与光束的拟合，通过透过率或光强度的改变来监控池架的正确位置，这个工作由图中的调整螺钉来完成。

    （三）使用微量比色皿的注意事项
    （1）无论何种微量池，在使用前一定要检查比色池与光斑的拟合状态；这点往往是使用者易于忽略的地方，结果造成测量值的重现性和噪声水平变差。
    （2）由于微量池内腔体的狭窄，故给清洗工作带来较使用普通池更大的麻烦，这点需要使用者给予充足的重视。








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  • 祥子

    第1楼2009/01/16

    哇塞，真是辛苦anping老师了。

    又长了点见识。

    anping老师，给点建议，能不能把文章里的关键语句用不同的颜色标识出来

    这样看注意力比较集中。

    另，anping老师，你图片是用什么编辑的啊，当然做的也很好。

    我一般用snagiteditor,抓图软件snagit自带的编辑工具，非常好用，体积小，速度快，功能全，破解版的。

    推荐给你哦。

    这里下：http://rapidshare.com/files/174342097/Tech.SnagitV9.1.0B.206.ZWTSerial.rar




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  • 夕阳

    第2楼2009/01/16

    应助达人

    这个抓图软件是我单位网管给安装的，名称叫“HyperSnap 6.13.02”软件。
    抓拍后再转到【画图】中加添文字处理即可，但我没有上述软件。
    对于你提的建议我马上修改，谢谢你的忠告。

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  • 祥子

    第3楼2009/01/16

    anping老师太客气了。

    hyper那个软件确实也很有名。

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  • yflh123

    第5楼2009/01/19

    张知识了，光谱测量液体几乎都要用到微量的比色皿，平时拿来用，没想到还有这麽多讲究·~

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  • liu999999

    第6楼2009/01/20

    还真没有接触过微量比色皿，这次长知识了。

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  • pear121

    第7楼2009/05/28

    德国hellma的超微量比色皿使用就和平常的比色皿一样，非常方便。推荐大家使用。
    检测只需1微升的样本，适用于极微量样本的检测
    直接使用加样器将待检测样本加在比色皿的表面
    样本无需进行稀释，即可进行快速、简便的检测，检测范围宽。

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  • asonlopin

    第8楼2009/08/20

    您好！请问5ul的比色池要如何使用呀？我手上正好有一个和您图片中一摸一样的5ul比色池，金属材料做的，请问样品要点在哪里呀？谢谢！！

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  • asonlopin

    第9楼2009/08/20

    请问能否提供一下1ul比色皿的资料？谢谢！！

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  • 大陆

    第10楼2009/08/20

    nemoium很能洞察细节问题嘛，我一般使用键盘上的抓图键，很绿色，呵呵，这是闲话。

    anping老师能不能对照一下微量比色皿附件及微量比色皿的更换频率及费用和使用通常比色皿耗费样品所需费用？

    nemoium 发表:hyper那个软件确实也很有名。

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