太白金星
第1楼2009/02/22
土壤全磷量即磷的总贮量,包括有机磷和无机磷两大类。土壤中的磷素大部分是以迟效性状态存在,因此土壤全磷含量并不能作为土壤磷素供应的指标,全磷含量高时并不意味着磷素供应充足,而全磷含量低于某一水平时,却可能意味着磷素供应不足。因此了解土壤磷总贮量,对生产实践仅有一定的参考价值。
土壤全磷测定的待测液制备,一般分为碱熔法和酸溶法两类。在碱熔法中以Na2CO3熔融分解最为完全,准确度较高,但熔融时需要铂坩埚,不适宜用于常规分析。在酸溶法中以 H2SO4———HCLO4法较好。此法对钙质土壤分解率较高,但对酸性土壤分解不易十分完全,结果往往稍微偏低。
待测液中磷的测定,一般都采用钼蓝比色法,所用的显色剂有“钼锑抗”(钼酸铵—酒石酸锑钾—抗坏血酸试剂的简称),氯化亚锡,抗坏血酸和1,2,4—氨基萘酚磺酸等。其中钼锑抗法有手续简便,颜色稳定,干扰离子允许量大等优点,目前国内应用较广。
1.酸溶—钼锑抗比色法:
(1)方法要点: 在高温条件下,土壤中含磷矿物和有机磷化合物与高沸点的H2SO4和强氧化剂HCLO4作用,使之完全分解,全部转化为正磷盐而进入溶液,然后用钼锑抗 比色法测定。
(2)主要仪器:分光光度计,2KVA方电炉,3KVA调压变压器。
(3)试剂: A.浓H2SO4(二级)。 B.HCLO4(二级,70-72%)。 C.钼锑贮存液。浓H2SO4(二级)153毫升缓慢倒入约400毫升水中,搅拌,冷却。10克钼酸铵(二级)溶解于约60。C的300毫升水中,冷却。然后将H2SO4溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中,再加入100毫升0.5%酒石酸锑钾溶液,最后用水移释至1升,避光贮存。此贮存液含1%钼酸铵,5.5摩尔/升1/2 H2SO4。 D.钼锑抗显色剂。1.50克抗坏血酸溶液于100毫升钼锑贮存液中。此液须随配随用,有效期一天。 E.二硝基酚指示剂。0.2克2,6-二硝基酚或2,4二硝基酚溶于1000毫升水中。 F.5ppmP标准溶液。0.4390克KH2PO4(二级,105。C烘过2小时)溶于200毫升水中,加入5毫升浓H2SO4,转入1升容量瓶中,用水定容。此为100ppmP标准溶液,可以长期保存。取此溶液准确稀释20倍,即为5ppmP标准溶液,此溶液不宜久存。
(4)操作步骤:A.待测液的制备:称取通过100目的烘干土壤样品1克(精确到0.0001克)置于50毫克三角瓶中,以少量水湿润,加入浓H2SO48毫升,摇动后(最好放置过夜)再加入70-72%的HCLO410滴,摇匀,再加热消煮。缓慢升温,HCLO4烟雾消失后,再提高温度,使H2SO4发烟回流,待瓶内溶液开始转白后继续消煮20分钟,全部消煮时间为45-60分钟。将冷却后的消煮液用水小心地冲入100毫升容量瓶中,冲洗时用水应量少次多,轻轻摇动容量瓶,待完全冷却后,以水定容,用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100毫升三角瓶中。同时做空白试验。B.测定:取上述待测液2-10毫升(含5-25微克P)于50毫升容量瓶中,用水稀释至约30毫升,加二硝基酚指示剂2滴,用稀NaOH溶液和稀H2SO4溶液调节pH值至溶液刚呈微黄色。然后加入钼锑抗显色剂5毫升,摇匀,用水定容,。在室温高于15。C的条件下放置30分钟后,在分光光度计上用波长700纳米比色,以空白试验溶液为参比液调零点,读取吸假值。在工作曲线上查出显色液的Pppm数。颜色在8小时内可保持稳定。C.工作曲线的绘制:分别吸取5ppm标准溶液0,1,2,3,4,5,6毫升于50毫升容量瓶中,加水稀释至约30毫升,加入钼锑抗显色剂5毫升,摇匀,定容。即得0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6ppmP标准毓溶液,与待测液同时比色,读取吸收值。在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标,Pppm数为横坐标纸上以吸收值为纵坐标,Pppm数为横坐标,绘制成工作曲线。
2.碱熔—钼锑抗比色法
(1)方法要点:样品用Na2CO3高温熔融,使难溶性的磷酸盐及有机态磷分解成可溶性正磷酸盐,以稀H2SO4溶解熔融物,制备成待测液,用钼锑抗比色法测定。
(2)主要仪器:铂坩埚,高温电炉,分光光度计。
(3)试剂:
A:无水Na2CO3(二级),磨细,通过250微米(60目)。
B:6摩尔/升1/2 H2SO4
其余试剂同酸溶一钼锑抗比色法。
(4)操作步骤;称取通过100目的烘干土样品0.25(精确到0.0001克)置于铂坩埚中,另外称取研细的无水Na2CO32克,将其中的1.8克小心地用平头玻璃棒与样品充分搅拌混匀,其余的铺于混合物表面,并轻轻敲动坩埚,铺平。将坩埚放入高温电炉中,升温至900-920。C熔融,20分钟后取出后趁热时揭盖观察熔块状态:倘若表面成凹形颜色均一而气泡时,则熔融已完全。取出熔块,放入100毫升高型烧杯中,盖上表面皿,小心地加入约10毫升6摩尔/升1/2 H2SO4溶解熔块,并用热水洗净坩埚。将烧杯中的内溶物洗入100毫升容量瓶中,用热水及带橡皮帚玻璃棒将烧杯洗净,洗涤液均倒入上述容量瓶中,冷却后定容,用干燥漏斗及无磷滤纸过滤于三角瓶中。
吸取滤液5-10毫升(含5-25微克P)于50毫升容量瓶中加水稀释至约30毫升,用钼锑抗比色法测定磷量(同酸溶—钼锑抗比色法)。在整个操作过程中,同时作试剂空白试验。
(5)结果计算:同酸溶—钼锑抗比色法。
太白金星
第2楼2009/02/22
土壤农化分析:土壤全磷测定(硫酸一高氯酸消煮法)
土壤全磷测定(硫酸一高氯酸消煮法)
试剂:浓硫酸、高氯酸、二硝基酚(称取0.25g二硝基酚溶于100ml蒸馏水中。)、4mol/L氢氧化钠、2mol/L(1/2)H2SO4(吸取浓硫酸6ml缓缓加入80ml水,边加边搅,冷却后定容到100ml。)、钼锑抗试剂(A.5g/L酒石酸氧锑钾溶液:取酒石酸氧锑钾溶液0.5g溶于100ml水中。B.钼酸铵—硫酸溶液:称取钼酸铵10g,溶于450ml水中,缓慢地加入浓硫酸153ml,边倒边搅。再将A与B混合,最后定容到1L。充分混匀,贮于棕色瓶中。临用前(当天),称取左旋抗坏血酸(C6H8O5,化学纯)1.5g,溶于100mL钼锑混合液中,混匀,此即钼锑抗试剂。有效期24小时,如藏冰箱中则有效期较长。此试剂中H2SO4为5.5mol·L-1(H+),钼酸铵为10 g·L-1,酒石酸氧锑钾为0.5 g·L-1,抗坏血酸为1.5 g·L-1)。磷(P)标准溶液(准确称取45℃烘干4—8小时的分析纯磷酸二氢钾0.2197g于小烧杯中,以少量水溶解,加浓硫酸5ml,将溶液全部洗入1000ml容量瓶中,用水定容至刻度,充分摇匀,此溶液即为含50mg/L的磷基准溶液。吸取50ml此溶液稀释至500ml,即为5mg/L的磷标准溶液,此溶液不能长期保存。)
操作步骤:在分析天平上准确称取通过100目筛(孔径为0.25mm)的土壤样品1g(精确到0.0001)置于50ml开氏瓶中,以少量水湿润,并加入浓H2SO48ml,摇动后(最好放置过夜)再加入70—72%的高氯酸(HClO4)10滴摇匀。于瓶口上放一小漏斗,置于电炉上加热消煮至瓶内溶液开始转白后,继续消煮20分钟,全部消煮时间约为45—60分钟。将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml容量瓶中,冲冼时用水应少量多次。轻轻摇动容量瓶,待完全冷却后,用水定容,用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100ml三角瓶中。同时做空白试验。吸取滤液5ml于50ml容量瓶中,用水稀释至30ml,加二硝基酚指示剂2滴,用稀氢氧化钠(NaOH)溶液和稀硫酸(H2SO4)溶液调节pH至溶液刚呈微黄色。加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀,用水定容至刻度。在室温高于15℃的条件下放置30分钟后,在分光光度计上以700nm的波长比色,以空白试验溶液为参比液调零点,读取吸收值,在工作曲线上查出显色液的P—ug/mL数。
标准曲线的绘制:分别吸取5ug/mL标准溶液0,1,2,3,4,5,6ml于50ml容量瓶中,加水稀释至约30ml,加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。即得0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6ug/mL P标准系列溶液,与待测溶液同时比色,读取吸收值。在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标,Pug/mL数为横坐标,绘制成工作曲线。
结果计算:全P ug/Kg=显色液ug/mL×显色液体积×分取倍数×10-3/W
显色液Pug/mL—从工作曲线上查得的Pug/mL;
显色液体积—本操作中为50ml;
分取倍数—消煮溶液定容体积/吸取消煮溶液体积;
10-3—将ug换算成g
W—土样重(g)。