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【求助】C18柱中,100A和300A的有什么区别?

  • liuyangkings
    2009/04/10
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • C18柱中,100A和300A的有什么区别?各自的特点都有什么?对样品的保留时间和分离度是否有影响
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  • 知足常乐!

    第1楼2009/04/10

    主要是填料的粒径的不同
    100A的粒径,比表面积大些,吸附能力稍强,分离度会好些

    liuyangkings 发表:C18柱中,100A和300A的有什么区别?各自的特点都有什么?对样品的保留时间和分离度是否有影响

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  • tanggangfeng

    第2楼2009/04/10

    好像是填料间的空隙,300a常用于多肽,小分子蛋白质。
    100a,一般 用于分子量小于5000的。

    wenshaowei-2008 发表:主要是填料的粒径的不同
    100A的粒径,比表面积大些,吸附能力稍强,分离度会好些

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  • liuyangkings

    第3楼2009/04/10

    这个100A或者300A到底指的是什么呢?上面一个说是粒径,一个说是间隙.我感觉应该不是粒径。

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  • liuyangkings

    第4楼2009/04/10

    应该是硅胶颗粒表面的孔径吧。是孔径大,载量大?还是孔径小载量大?有没有知道具体区别的呢? 上面说多肽纯化一般选用300A。是什么原因?是因为分子量的原因吗?

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  • richies

    第5楼2009/04/10

    硅胶,是个多孔球体,一般说的5um,10um,3um,是指硅胶球体的直径

    这个300A,100A,60A,是指这个多孔球体上,孔的直径

    孔越大,可以通过的分子量越大,一般60A在3000以内,100A在6000以内,300A就可以到2000了,一些多肽啊,小分子蛋白啊,就要用300A的柱子来分离

    但是,孔越大,相应的比表面积就小很多,300A的分离度就要比100A的差一点

    liuyangkings 发表:这个100A或者300A到底指的是什么呢?上面一个说是粒径,一个说是间隙.我感觉应该不是粒径。

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  • liuyangkings

    第7楼2009/04/21

    谢谢楼上的各位

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  • huanke

    第8楼2009/04/21

    同意5楼的看法,关键不是分离程度的大小,而是根据你所要测试的物质所定。

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  • 苏幕遮

    第9楼2009/04/21

    小分子当然要用小孔径的硅胶去分离,因为硅胶颗粒也是由更小的颗粒聚合而成,因此表观上看来为一个小球的表面有很多小孔。小孔的孔径与样品分子在色谱柱中的分子运动有很大关系。如果小孔的孔径大于样品分子的体积,则样品能扩散进入硅胶颗粒内部,这就意味着小孔内部的固定相也参与了作用,色谱柱的容量因子也相应增加了,同时分离度也会增加,但样品分子在色谱柱内的经过的路程也增加,加剧了峰的扩散效应。如上所述,对于蛋白质等大分子,为了增加分离度,理应选择孔径比其分子体积大的硅胶颗粒。

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