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【求助】液相重现性不好

液相色谱(LC)

  • 安捷伦 1100
    C8柱
    流动相 50%HCN+50% 0.1%H3PO4

    我每次检测都会做两遍,两次结果相差 0.5%之内才会通过

    最近结果相差很大,今天做的第一次是95%
    第二次就是77%

    基线很稳定,柱压也稳定
    盼望各位高手指教,谢谢啦!
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  • huaibeijiayuan

    第1楼2009/04/02

    检查一下样品的稳定性,以前我曾碰到样品溶解后见光分解的现象。看看是否是类似原因,或者柱温等

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  • xygu

    第2楼2009/04/02

    这个样品还比较稳定,我是按照国外的方法做的
    他们就是用HPLC
    我怀疑是我们的柱子有问题--第一次做的结果都比第二次的好,非常奇怪

    huaibeijiayuan 发表:检查一下样品的稳定性,以前我曾碰到样品溶解后见光分解的现象。看看是否是类似原因,或者柱温等

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  • 知足常乐!

    第3楼2009/04/02

    同一样品多进几针
    看峰面积有变化没

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  • 老多_小多

    第4楼2009/04/02

    今天做的第一次是95%
    第二次就是77%
    两次是怎么做的,同一个溶液测定2次还是同一个样品处理2次?

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  • xygu

    第5楼2009/04/02

    同一个溶液,
    半小时之后进的第二针。
    另外我还想请教下,我的出峰时间只有1.5 分钟,是不是方法不合适造成的重现性不好?

    emoc98311 发表:今天做的第一次是95%
    第二次就是77%
    两次是怎么做的,同一个溶液测定2次还是同一个样品处理2次?

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  • qingxilengyue

    第6楼2009/04/02

    楼主,出峰时间的确太短了,还应考虑仪器的死时间,建议通过用长柱或改变流动相条件加长时间,再看看重现性如何。

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  • xygu

    第7楼2009/04/02

    恩,我们公司的标准方法是用C18的柱子,
    现在仪器上用的是C8的柱子,
    不知道这个的会不会影响很大

    qingxilengyue 发表:楼主,出峰时间的确太短了,还应考虑仪器的死时间,建议通过用长柱或改变流动相条件加长时间,再看看重现性如何。

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  • xygu

    第8楼2009/04/02

    峰面积没有变化,但是峰分裂了

    wenshaowei-2008 发表:同一样品多进几针
    看峰面积有变化没

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  • 分享快乐

    第9楼2009/04/02

    你是用什么稀释的样子?峰分叉也和你稀释样子有关
    再有C18和C8没太大区别,只是C18分的会更好一些,你看看要求的柱长一样吗?你用的是多长的?50的?出峰时间这么早也证明条件选的不好,一般极性很大的例如溶剂才会这么早出峰的,可改一下梯度,让主峰在5分钟以后出峰再仔细对对

    xygu 发表:峰面积没有变化,但是峰分裂了

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  • xygu

    第10楼2009/04/02

    huijingxu 发表:你是用什么稀释的样子?峰分叉也和你稀释样子有关
    再有C18和C8没太大区别,只是C18分的会更好一些,你看看要求的柱长一样吗?你用的是多长的?50的?出峰时间这么早也证明条件选的不好,一般极性很大的例如溶剂才会这么早出峰的,可改一下梯度,让主峰在5分钟以后出峰再仔细对对

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