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【求助】MnP酶活测定及计算方法求助

hc1027

2009/04/11

紫外可见分光光度计（UV）

我是做关于酶解木质素方面的。实验中要测定MnP（锰过氧化物酶）的酶活。
我是用紫外光度法中的动力学测MnP的酶活，
（测定方法：先将0.2113g MnSO4 溶解于1 L 酒石酸缓冲液( 50mmol·L - 1 ,pH = 4.5) 中,再取2.4 mL 的该溶液和0.6mL 粗酶液混匀,即得3 mL 反应液. 在30 ℃下,往此反应液中加80μL H2O2 溶液(20 mmol·L - 1 ) 启动酶促反应,并在290 nm 波长下测定反应2 min 前后的反应液吸光度变化. 一个酶活力单位(U) 定义为每分钟氧化Mn2 + 产生1μmol Mn3 + 所需的酶量.）

问题是我得到了吸光度随时间（2min）的变化曲线后，如何对它进行处理？应该取那些数据进行计算？如何得到要求的酶活？能帮小弟找一些这方面的资料吗？不胜感激。
我无法上传变化曲线，所以大致手绘下：

精
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dong3626

第1楼2009/04/11

应助达人

感觉是缺少一个吸光值和浓度之间的关系式。
我记得以前做的时候有个关系式的。。。现在给忘了。。

你可以查找下这个测定的具体方法。很多文献都是很简单的描述。

0

hc1027

第2楼2009/04/11

找了些文献，但都没有说如何计算的，更没有关于这种曲线的分析之类的，都是直接将酶活的数字给出来了。

请问还有没有高人能指点指点？
dong3626 发表:感觉是缺少一个吸光值和浓度之间的关系式。
我记得以前做的时候有个关系式的。。。现在给忘了。。

你可以查找下这个测定的具体方法。很多文献都是很简单的描述。

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精
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石英晶体微天平

第3楼2009/04/13

可以用QCM试试，把木质素固定在镀金的石英传感片上，当发生水解反应时传感器的频率会逐渐升高。

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