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【讨论】关于示差吸光光度法

紫外可见分光光度计(UV)

  • 悬赏金额:50积分状态:已解决
  • 最近在一本书上看到有个“示差吸光光度法”,用于测定高浓度的样品溶液。

    以前对分光的概念都是只能测定低浓度的样品,如果样品浓度太高都要稀释到很稀的浓度才能测定,要使分光的读数限制在一定的范围内才能得出准确的结果

    但这个示差吸光光度法据说可以不用稀释,直接测定高浓度的样品,只是用的参比溶液不是蒸馏水或空白溶液,而是与待测样品浓度相差不大的标准溶液。

    其测量的基本原理是:分光测定的是标准溶液与样品溶液吸光度的差值,而这个吸光度差值与这两个溶液浓度的差值成正比(其实跟一般分光是一样的,只不过一般分光测定的是样品溶液与空白溶液的吸光度差值),其关系式如下:
    A(差)=A(样)-A(标)=a*b*[c(样)-c(标)]=a*b*c(差)

    据说这个方法的准确度比一般的分光光度法准确度要高很多,只要参比溶液的浓度选得合适,非常接近样品浓度的话,最小误差可达0.3%。但它这是与直接测定相比,不知道与将样品稀释至合适浓度后再用一般分光光度法测定的结果相比,那个的误差更小一些呢?

    问问各位,有没有做过这个方法的?或者对此有过研究的,讨论讨论呢!
    仅仅是讨论,没有对错,欢迎大家踊跃发言,来者不拒



    PS:再问一句,上面的表情怎么没有动画效果了呢?

tutm 2009/06/14

[quote]原文由 [B]yankunsu[/B] 发表: 我想问的是a. b代表什么?是浓度吗?还是什么[/quote] 楼主写的这个公式只是一个通行的原理,a. b在不同实验方法下有其特定的含义。你如果真的要使用它做实验,那还要搞清怎么做才行。建议你到下面主题下载一本资料看看,第76-81页,弄清3种做法,就会明白了。 http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20080923/1501603/

IDONTKNOW 2009/06/12

72型就可以做了

yankunsu 2009/06/14

[quote]原文由 [B]yankunsu[/B] 发表: [quote]原文由 [B]hrcren[/B] 发表: 最近在一本书上看到有个“示差吸光光度法”,用于测定高浓度的样品溶液。 以前对分光的概念都是只能测定低浓度的样品,如果样品浓度太高都要稀释到很稀的浓度才能测定,要使分光的读数限制在一定的范围内才能得出准确的结果 但这个示差吸光光度法据说可以不用稀释,直接测定高浓度的样品,只是用的参比溶液不是蒸馏水或空白溶液,而是与待测样品浓度相差不大的标准溶液。 其测量的基本原理是:分光测定的是标准溶液与样品溶液吸光度的差值,而这个吸光度差值与这两个溶液浓度的差值成正比(其实跟一般分光是一样的,只不过一般分光测定的是样品溶液与空白溶液的吸光度差值),其关系式如下: A(差)=A(样)-A(标)=a*b*[c(样)-c(标)]=a*b*c(差) 据说这个方法的准确度比一般的分光光度法准确度要高很多,只要参比溶液的浓度选得合适,非常接近样品浓度的话,最小误差可达0.3%。但它这是与直接测定相比,不知道与将样品稀释至合适浓度后再用一般分光光度法测定的结果相比,那个的误差更小一些呢? 问问各位,有没有做过这个方法的?或者对此有过研究的,讨论讨论呢! 仅仅是讨论,没有对错,欢迎大家踊跃发言,来者不拒 [em09510][em09510][em09510][em09510][em09510] PS:再问一句,上面的表情怎么没有动画效果了呢?[/quote] 我想问的是a. b代表什么?是浓度吗?还是什么[/quote] 版主在吗,请尽快给我恢复,我想用它解决几个问题

shaweinan 2009/06/21

[quote]原文由 [B]dh_song[/B] 发表:   呵呵,这个方法是个老方法,现在用的少了。主要是用于老仪器上的(与光电倍增管没有关系),特别是指针式的仪器上,它利用标尺扩展将微小的差距拉大至满量程,再利用相似三角形原理来求出样品与标准的距离。主要用在高吸光度区,自从微处理机介入分析仪器后,其卓越的数据分辨能力及非线性曲线拟合功能已经能满足日常需要。除非仪器没有非线性曲线拟合功能,这个方法也可一用。[em09502][/quote] [quote]原文由 [B]xy642316[/B] 发表:   应是专门的差示光度计吧?[/quote]   普通分光光度计就可以进行分析,只不过如果软件没有此项功能的话,需要手动来做。

season0818 2009/06/04

稀释方便。

  • 该帖子已被版主-初学者&九点虎加10积分,加2经验;加分理由:问得好
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  • tutm

    第1楼2009/06/04

    试过,主要想解决吸光度2左右溶液的测试。但是使用下来感觉还不如稀释方便。

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  • 蜗牛

    第3楼2009/06/05

    用差示法测定比直接稀释后测定要准确一些,避免了高浓度溶液由于稀释带来的误差,但是比较麻烦的就是确定所用的参比标准溶的浓度,而且用多个参比标准溶液配制标准曲线进行测定要比单点比较法的准确度高。

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  • auto1235

    第4楼2009/06/05

    感觉这种测试多余,不如使用短光程比色皿。如2mm,5mm.

    tutm 发表:试过,主要想解决吸光度2左右溶液的测试。但是使用下来感觉还不如稀释方便。

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  • hrcren

    第5楼2009/06/05

    它不是标液的浓度跟样品浓度越接近误差越小吗,怎么用离样品浓度远近不一的点来做标线呢?

    jaylin621 发表:用差示法测定比直接稀释后测定要准确一些,避免了高浓度溶液由于稀释带来的误差,但是比较麻烦的就是确定所用的参比标准溶的浓度,而且用多个参比标准溶液配制标准曲线进行测定要比单点比较法的准确度高。

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  • colindrj

    第6楼2009/06/07

    这样做有一个要求,机器必须是光电倍增管的机器,否则没有这个现象

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  • hrcren

    第7楼2009/06/10

    为什么昵?

    colindrj 发表:这样做有一个要求,机器必须是光电倍增管的机器,否则没有这个现象

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  • 初学者&九点虎

    第8楼2009/06/10

    其实这里涉及到一个问题,就是单点比标准曲线有时候更准确的问题,那就是在浓度接近的时候,楼主的问题提的很好,赞一个!
    我没有具体做过,但是研究过相关的一些资料

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  • hrcren

    第9楼2009/06/11

    有没有版主能够回答我最后一个问题呀,就是上面的表情怎么没有动画了呢?我记得以前好像是有动画效果的,那样看起来多好啊

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  • pfz1985

    第10楼2009/06/11

    没有用过,感觉一般的分光光度计能做的就没必要再用视差,只是浓度高的如果用视差效果好像是好点,只要还得要看实际运用

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