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【求助】标准曲线浓度配制疑问

液相色谱(LC)

  • 请教各位大虾个问题:在做液相标准曲线时,你们是配制系列浓度,还是同一个浓度进不同的ul做标准曲线啊?请问后面这种方法可靠性好吗?谢谢
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  • 冷冷的冰雨

    第1楼2009/08/04

    6种不同浓度的对照品进样,以峰面积和进样量做标准曲线,可靠不可靠看r就可以了

    gh333666 发表:请教各位大虾个问题:在做液相标准曲线时,你们是配制系列浓度,还是同一个浓度进不同的ul做标准曲线啊?请问后面这种方法可靠性好吗?谢谢

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  • 水管修理工

    第2楼2009/08/04

    我举得还是有区别的有条件的还是配置不同浓度的比较安全可靠。实在没办法的才用不同进样体积(跟单点校正差不多)。可以说一个现象,采不同进样

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  • 雾非雾

    第3楼2009/08/04

    应助达人

    同一个浓度进不同的ul做标准曲线的方法不可靠,因为仪器的响应不和进样量成完全的正比的。

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  • 该帖子已被版主-老多_小多加2积分,加2经验;加分理由:很有道理
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  • 老多_小多

    第4楼2009/08/04

    确实这样,用不同浓度更科学

    mcds 发表:同一个浓度进不同的ul做标准曲线的方法不可靠,因为仪器的响应不和进样量成完全的正比的。

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  • 有水有渝

    第5楼2009/08/04

    应助达人

    如果是精度较好的自动进样器用进不同的体积是可行的,手动的话最好还是配系列浓度,全量进样。前者做曲线的时候按进样量对面积作图就行了。

    mcds 发表:同一个浓度进不同的ul做标准曲线的方法不可靠,因为仪器的响应不和进样量成完全的正比的。

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  • jinxiazhu001

    第6楼2009/08/06

    我认为进不同uL的标准溶液结果不太准,因为进样器容易造成误差,还是稀释成不同浓度的溶液好。

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  • 蚊 子

    第7楼2009/08/06

    进样器有个定量环,是为了提高进样的重复性的,仪器既然要用到固定的定量环来提高重复性,那么可想而知进不同体积的同一浓度的标准液来做曲线有多不可靠!个人意见,不知道对不对

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  • jackyale

    第8楼2009/09/16

    我不这样认为。我用的是agilent 1100,以我的经验,r值肯定是进不同体积好,特别是在5-20μl之间,4个9肯定没问题。因为在这个范围内正常情况下,自动进样器的定量是非常准的。这样斜率肯定很准,误差主要在标准溶液的配制上,如果标准溶液浓度不准,就会引起截距的变化。但是毕竟你只需要配制一次标准溶液。
    而配不同浓度的标准溶液做标曲,需要配置多次标准溶液,容易带来操作误差。可能r值会不如第一种方法好。

    当然,还有就是标准溶液配法的影响。我的标品是用减重法直接称在顶上放有漏斗的容量瓶里的,个人感觉只要天平和容量瓶的误差还是比较小的。所以直接配高浓度,进不同体积。
    如果要用不同浓度的话,我就要从高浓度的标准品中吸取不同体积到容量瓶中,再以水定容。(低浓度的标准溶液直接称量,天平的精度不够)这一步会带来比较大的操作误差,最终影响标曲的结果。
    当然,如果直接称量溶解到容量瓶中,可能误差会小些。

    mcds 发表:同一个浓度进不同的ul做标准曲线的方法不可靠,因为仪器的响应不和进样量成完全的正比的。

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  • jackyale

    第9楼2009/09/16

    不好意思,我不赞同您的观点。这里说的利用不同进样量来建立标曲,肯定是可调进样量的自动进样器。我记得waters 717的说明书上,1-100μl的定量准确度在0.99以上。仪器好的话,自动进样的线性是很好的。

    wsad8008 发表:进样器有个定量环,是为了提高进样的重复性的,仪器既然要用到固定的定量环来提高重复性,那么可想而知进不同体积的同一浓度的标准液来做曲线有多不可靠!个人意见,不知道对不对

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  • maomaoyishuihan

    第10楼2009/09/16

    一般我采取的是配制系列标物的,不过先要测出仪器的检出限,标还是浓度低些好

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