很可能是甲醇比例太大,有盐析出,现在不知道你用的盐的浓度,不过我们一般用10mM。
你可以试着将A和B两个流动相改变一下,A改成10甲醇:90盐,B改成10盐:90甲醇,然后梯度变为A从100%变到10%或者更合适的比例,这样可能会好一点。
bank7233 发表:今天做样的时候,要用梯度淋洗,用的是甲醇和磷酸盐缓冲液,从甲醇比缓冲液10:90开始,到80:20时候,压力突然就不稳定了,判断是有气泡,然后排气泡。又重新开始,又是到了80:20的时候,压力就开始不稳定,跳动范围很大有30bar的样子,流动相我都做过脱气处理,处理方法是抽滤后超声,加上仪器里的在线脱气,以前做过都ok的,明天我准备重配缓冲液!还是想知道为什么这次这样了?诸位给点建议,