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【求助】压力不稳定的问题

液相色谱(LC)

  • 今天做样的时候,要用梯度淋洗,用的是甲醇和磷酸盐缓冲液,从甲醇比缓冲液10:90开始,到80:20时候,压力突然就不稳定了,判断是有气泡,然后排气泡。又重新开始,又是到了80:20的时候,压力就开始不稳定,跳动范围很大有30bar的样子,流动相我都做过脱气处理,处理方法是抽滤后超声,加上仪器里的在线脱气,以前做过都ok的,明天我准备重配缓冲液!还是想知道为什么这次这样了?诸位给点建议,
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  • 柏坡

    第1楼2009/08/06

    梯度洗脱压力波动是普遍现象,看看是否溶剂瓶里的滤头脏了。

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  • 东风恶

    第2楼2009/08/06

    建议您买一本书籍,慢慢研究就知道了,还有很多东西要自己去摸索的。

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  • 老多_小多

    第3楼2009/08/06

    梯度变化大,压力变化肯定大

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  • 〓猪哥哥〓

    第4楼2009/08/07

    跳动,是往上跳,还是往下跳?

    80:20,有机相比较较大,防止盐析。

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  • 〓猪哥哥〓

    第5楼2009/08/07

    还有注意看是不是哪个地方是不是有点堵,压力比以前上升了吧?

    单向阀注意下,做完用纯水不接柱子冲洗系统。如果纯水效果不佳,可用温水。

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  • Randy

    第6楼2009/08/07

    压力没有上升,重新回来纯甲醇做流动相时,压力没变,就是把缓冲液的比例大到80以后压力就会开始不稳定了

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  • isee

    第7楼2009/08/07

    估计是盐析的结果.

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  • 知足常乐!

    第8楼2009/08/07

    甲醇的氢键作用
    你换成乙腈肯定没有这种现象

    bank7233 发表:压力没有上升,重新回来纯甲醇做流动相时,压力没变,就是把缓冲液的比例大到80以后压力就会开始不稳定了

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  • jeanee

    第9楼2009/08/07

    学习学习 希望早日看到解决方法

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  • pandora98

    第10楼2009/08/08

    很可能是甲醇比例太大,有盐析出,现在不知道你用的盐的浓度,不过我们一般用10mM。
    你可以试着将A和B两个流动相改变一下,A改成10甲醇:90盐,B改成10盐:90甲醇,然后梯度变为A从100%变到10%或者更合适的比例,这样可能会好一点。

    bank7233 发表:今天做样的时候,要用梯度淋洗,用的是甲醇和磷酸盐缓冲液,从甲醇比缓冲液10:90开始,到80:20时候,压力突然就不稳定了,判断是有气泡,然后排气泡。又重新开始,又是到了80:20的时候,压力就开始不稳定,跳动范围很大有30bar的样子,流动相我都做过脱气处理,处理方法是抽滤后超声,加上仪器里的在线脱气,以前做过都ok的,明天我准备重配缓冲液!还是想知道为什么这次这样了?诸位给点建议,

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