【求助】怎么样用梯度洗脱把两个重叠的峰洗开

起始比例再小一点看看

梯度改变流动相的比例可能成效不大，还是从色谱柱着手

shendanqun 发表:

我们的梯度条件是(流动相是:乙腈和水):0-5min 乙腈浓度 为30%-40%
5-15min 乙腈40-70% 15-20min 浓度为70-100% 现在15.7min左右的地方有杂峰重叠 .测的物质是雌二醇 .希望有关认识帮忙知道一下 谢谢

把乙腈的起始比例改小，5-10，如果柱子可以用纯水的话，起始可以改为100的水。
不行的话就只能换柱子了

关键是你17min还有一个峰，如果改变梯度，后面的又分不开了，换根柱子吧

可以改变起始比例，实在不行只能换柱子了

5-20分钟，梯度中乙腈浓度可以减小些，时间适当加长些。看看效果如何

改变梯度，建议试试这个梯度，
0 30
5 40
15 55
25 70
30 100
确定两个物质分离后，再改变梯度压缩分离所需时间。

shendanqun 发表:

我们的梯度条件是(流动相是:乙腈和水):0-5min 乙腈浓度 为30%-40%
5-15min 乙腈40-70% 15-20min 浓度为70-100% 现在15.7min左右的地方有杂峰重叠 .测的物质是雌二醇 .希望有关认识帮忙知道一下 谢谢

建议你把把有机相更换为乙腈+甲醇（50/50），同时提高有机相浓度5-10%

shendanqun 发表:

我们的梯度条件是(流动相是:乙腈和水):0-5min 乙腈浓度 为30%-40%
5-15min 乙腈40-70% 15-20min 浓度为70-100% 现在15.7min左右的地方有杂峰重叠 .测的物质是雌二醇 .希望有关认识帮忙知道一下 谢谢