液相色谱(LC)
rigmarole
第1楼2009/08/27
咦,第一次发帖就发漏字了 应该是:有谁用过HPLC(制备型)分离纯化合成的oligo DNA的?
richies
第2楼2009/08/27
大分子的DNA么?这个一般不用HPLC来做的吧一般是用FPLC,用Sphedax填料来做
第3楼2009/08/27
不是一般提取的那种DNA,是化学合成的,只有40多个mer(bp)的单链寡核苷酸。好像论坛都没啥人做过哦~~~都没人回复
第4楼2009/08/28
一个ATP的分子量为507,按核苷酸的平均分子量类似于ATP计算,40个核苷酸就是2W分子量,建议你可以试一试300A的C18柱做下反相梯度分离,梯度范围做的大一点目前核酸的HPLC做的真的不多,不过估计跟多肽的HPLC分离制备比较接近,如果查不到相应的文献只能自己去摸条件了
第5楼2009/08/28
谢谢啦!我不会加分~~~现在只有一点相关的资料,所以想向各位大哥大姐求救啦,真没想到回复的这么少,不过还好还有大哥你回复。
第6楼2009/08/28
在Agilent的手册上面,有一个专门用来分离OLIGO的色谱柱,叫ZORBAX OLIGO,你可以试一试,我看到他有分离24和25mer的应用报告
It is me!
第7楼2009/08/29
一般用C18柱子做就可以的。流动相通常用纯水和乙腈。因为这样便于随后的冷冻干燥。
第8楼2009/08/31
谢谢各位大哥的指点啦~~~希望能有更多的建议
第9楼2009/08/31
做制备前,要多在HPLC上摸摸分离条件不知道你现在手头有啥实验条件,HPLC仪器,300A的C18色谱柱是否有,如果有的话,可以尝试摸一下条件
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